[发明专利]一种从发酵液中提取色氨酸的工艺无效
申请号: | 200910019458.0 | 申请日: | 2009-10-20 |
公开(公告)号: | CN101691349A | 公开(公告)日: | 2010-04-07 |
发明(设计)人: | 左克峰;孙海远;郑雄敏;王震;万冬梅;吴承恩;王高星 | 申请(专利权)人: | 山东恩贝生物工程有限公司 |
主分类号: | C07D209/20 | 分类号: | C07D209/20 |
代理公司: | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人: | 王汝银 |
地址: | 256219 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 发酵 提取 色氨酸 工艺 | ||
技术领域
本发明涉及一种色氨酸的生产方法,具体为一种从发酵液中提取色氨酸的工艺。
背景技术
色氨酸,英文名:Tryptophan,化学名称:L-2-氨基-3(β-吲哚)丙酸,化学式:C11H12N2O2,学名:β-吲哚基丙氨酸(β-indolylalanine)。它有三种异构体。其消旋体是白色晶体,微溶于水,在碱性溶液中稳定,被强酸分解;左旋体是白色或微黄色片状晶体,无臭,味微苦。熔点289℃(分解),在水中微溶,在乙醇中极微溶解,在氯仿中不溶,在甲酸中易溶,在氢氧化钠试液或稀盐酸中溶解;右旋体是白色晶体,有特殊甜味,熔点281-282℃(分解),溶于水、热乙醇和氢氧化碱溶液。
L-色氨酸是杂环氨基酸,为人体和动物生命活动所必需的8种氨基酸之一,是重要的营养剂,广泛应用于氨基酸输液、综合氨基酸制剂、营养补充剂、烟酸缺乏症治疗、安神药(调节精神节律、改善睡眠)、食品和饲料添加剂。近年来,随着国内外饲料工业和医药工业的不断发展,色氨酸成为一种国际市场发展前景良好、中国市场需求较大的产品。色氨酸的生产最早主要依靠化学合成法和蛋白质水解法,但是随着对微生物法生产色氨酸研究的不断深入,这种方法已经走向实用并且处于主导地位。微生物法大体上可以分为直接发酵法、微生物转化法和酶法。以微生物直接发酵生产色氨酸已具有一定规模的工业化生产能力。直接发酵法获得的色氨酸发酵液中含有大量的菌丝体、蛋白、色素等杂质,必须通过一定的提取分离技术才能获得纯度高、透光率好的色氨酸。
目前色氨酸的提取纯化技术主要采用吸附和离子交换法,在低级脂肪醇存在下通过中和或降温重结晶,工艺复杂。同时采用有机溶剂进行色氨酸的提取,增加溶剂回收和后处理难度,对环境造成不利影响。
日本专利公开说明书(JP895/1983)采用色氨酸溶液先通过非极性多孔树脂,再通过超滤的方法提取色氨酸,但杂质去除不理想,达不到高透光率要求。日本专利公开说明书(JP39857/1984)提出了色氨酸用碱液溶解,在低脂肪醇或酮存在下中和结晶,提高纯度,但杂质去除仍不充分,透光率很难达到95%,而且,使用了大量溶剂,造成后续溶剂处理难度。日本专利公开说明书(JP126070/1986)将色氨酸溶解在95-100℃的酸性溶液中,用活性炭吸附率除炭后,再经过非极性多孔树脂吸附,洗脱色氨酸,在低脂醇存在下中和晶体,透光率也不理想。美国专利说明书(US5057615)中,将色氨酸在40-115℃的醋酸水溶液中,先用活性碳吸附,除碳后降温结晶,同样存在色氨酸分解变色问题。国内色氨酸纯化技术报道较少,大都采用离子交换树脂吸附色氨酸,该法的缺陷是:色氨酸易于氧化,收率不稳定;提取色氨酸杂质较多、色泽深;耗水量大,酸碱用量大,在生产中会产生大量的废渣和废水,污染环境。
综上所述,目前国内外在色氨酸的提取工艺中大都存在色氨酸降解、脱色不彻底、对环境的污染、后续有机溶剂的处理问题等。
发明内容
为了克服现有的色氨酸提取工艺中存在的缺点,本发明提供一种色氨酸清洁生产新工艺,本发明以色氨酸发酵液为原料,经酸化、陶瓷膜洗滤、有机膜超滤、间歇浓缩结晶、离心分离和干燥工艺步骤获得高纯度的色氨酸,并采用离子交换除盐技术处理结晶母液循环回收产品,提高产品收率。它不仅打传统的工艺路线长、须用大量有机溶剂进行重结晶的繁琐步骤,而且使该工艺更加有利于工艺化生产,减少生产中环境的污染。
本发明的技术方案是:一种从发酵液中提取色氨酸的工艺,其工艺步骤为:
(1)在线加热稀释酸化技术进行发酵液pH值调节
将发酵液加水稀释1倍,并将发酵液加热至温度为50-100℃,采用静态混和技术,加入浓度为70-98%的硫酸,通过控制发酵液及硫酸的流量比例调节pH至3-6,使色氨酸以溶液状态存在于发酵液中,并使菌体蛋白变性,适宜于菌体分离;
(2)陶瓷膜连续在线洗滤
将经步骤(1)酸化的发酵液,经陶瓷膜在线过滤,除去发酵液中的全部菌丝体;所述陶瓷膜膜孔径为50nm,控制膜过滤的操作温度为50-90℃,进膜压力为1.5-3.0bar,过滤出菌渣,原料液体积浓缩至菌渣体积的8-15倍,菌渣经浓缩喷干可做菌体蛋白;
(3)卷式有机膜除蛋白、大分子杂质、脱色
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