[发明专利]一种牛舌草总黄酮提取纯化工艺

说明书

技术领域：

本发明涉及一种维吾尔药的提取方法，具体涉及牛舌草总黄酮的提取、纯化和干燥方法。

背景技术：

牛舌草为紫草科植物意大利牛舌草Anchusa italice Retz.或琉璃苣Borage officinales L.的地上部分。夏季花盛期，一般割取地上部分晒干。气微芳香，味淡，具粘性，是维吾尔医治心脑血管疾病的常用药材之一，具有生湿生热、调节异常黑胆质、生湿补脑、祛寒补心、双薪悦智、润燥消炎、止咳平喘等功效。牛舌草的这些作用与其黄酮类成分有密切关系。研究表明黄酮类化合物具有抗菌、抗癌、抗氧化、抗病毒、消炎、降压和清热解毒等作用。由于黄酮类化合物的这些生物活性使得对它的研究进入了一个新的阶段，因此，牛舌草总黄酮的研究开发具有重要的经济效益和社会意义。

另外，牛舌草总提取物成分复杂，因含有较多的糖类而具有吸湿性，容易凝结，颗粒粗、黑，难以选择剂型。因此对牛舌草总黄酮进行纯化，使纯化后的产品符合中药新剂型的需要具有重要的意义。

传统的总黄酮提取方法有热水提取法、醇提法、其它有机溶剂萃取法。其中热水提取法收率很低，并且由于其极性大，易把蛋白质、糖类、无机盐等易溶于水的成分提取出来，因此易霉变，一般提取液存放10天左右就会有发霉、变质现象，提取液过滤、浓缩等操作困难且又费时，黄酮含量低。醇提是提取总黄酮最常用的方法。包括冷浸法、渗流法和回流法。冷浸法虽不需加热，但提取时间长、效率低。渗流法提取效率高、浸液杂质少，但费时长，溶剂用量大，操作麻烦。回流法效率最高，但受热易破坏药材的成分，不宜用此法。其它有机溶剂萃取法，这种方法设备简单，产品得率高，但产品中杂质含量较高，有机溶剂成本也较高。

本研究采用30％～50％乙醇为提取剂，电磁波加热，减压回流提取，提取物冷冻干燥，可减少提取物活性成分的损失，提高提取效率和收率，节约溶剂。利用大孔树脂纯化提取物，可以提高黄酮活性成分纯度和保存期限，使纯化后的产品符合中药新剂型的需要，并在临床和医药行业中得到应用。

发明内容：

本发明的一个目的是提供了一种牛舌草总黄酮的提取、纯化和黄酮类提取物的干燥方法。

本发明提供了一种牛舌草总黄酮的提取方法，由以下具体步骤组成：

1)取粉碎的牛舌草，以60％乙醇为溶剂，浸泡12小时，以药材质量10～20倍量的30％～50％乙醇为提取剂，加热至回流提取，收集提取液，减压回收乙醇，得浓缩液；

2)将步骤1得到的提取液浓缩到每毫升含提取物22.5mg，过滤，滤液用HPD-100或HPD-400或HPD-600或AB-8或D101大孔树脂进行纯化，工艺条件为：上样吸附时间为0～2.0h小时，水洗体积为1BV～3BV，水洗流速为1BV/h～4BV/h，洗脱剂为乙醇，洗脱用乙醇浓度为50％～90％，乙醇洗脱量为1.5BV～4BV，乙醇洗脱速度为1BV/h～4BV/h。

3)收集步骤2的乙醇洗脱液，真空冷冻干燥，收集干燥提取产物，封口，称重，置于干燥处。

本发明提供的牛舌草总黄酮提取方法步骤1中的加热方式选取电磁炉加热，功率为500W～1200W，优选800W。

本发明提供的牛舌草总黄酮提取方法步骤1中的回流方式为减压回流，压力条件＜20Pa，提取时间为1～3小时，优选提取时间为2小时。

本发明提供的牛舌草总黄酮提取方法步骤1中优选条件：以60％乙醇为溶剂，浸泡12小时，以药材质量15倍量的40％乙醇为提取剂，用功率为800W的电磁炉加热，减压至20Pa回流提取2小时。

本发明提供的牛舌草总黄酮提取方法步骤2中优选D101大孔树脂对滤液进行纯化，优选工艺条件为：上样吸附时间为1.0小时，水洗体积为2BV，水洗流速为2BV/h，洗脱剂为乙醇，洗脱用乙醇浓度为70％，乙醇洗脱量为3BV，乙醇洗脱速度为2BV/h。

本发明提供的牛舌草总黄酮提取方法步骤3中冷冻干燥机的真空度小于20Pa，冷凝温度为-40～-60℃，优选-50℃。

本发明提供的牛舌草总黄酮提取方法，获得牛舌草提取物的总黄酮质量含量＞55％，总黄酮转移率＞90％。

本发明具有以下优点：

1.减少提取物活性成分的损失。牛舌草有效活性成分对热不稳定，本发明以合适浓度乙醇为溶剂，采用电磁波加热，且减压回流，提取温度低，从而减少了因过热而引起的提取物活性损失。同时，本发明对提取物采用冷冻干燥，能够很好的保持提取物的有效活性。

2.本发明所采用的提取方法可以提高提取效率和收率，节约溶剂。