[发明专利]一种石油污染土壤修复固体菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.抗辐射不动杆菌(Acinetobacter radioresistens)，保藏号：CGMCC No.3094。

2.一种石油污染土壤修复固体菌剂，是由保藏号是CGMCC No.3095的红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)和权利要求1的抗辐射不动杆菌的一级种子液经液态和固态两步发酵培养后等量混合制成，所述抗辐射不动杆菌和红平红球菌的有效活菌数均在10⁹～10¹¹CFU/g之间。

3.如权利要求2所述的石油污染土壤修复固体菌剂的制备方法，其步骤如下：

(1)一级种子液：

将抗辐射不动杆菌和红平红球菌分别在牛肉膏蛋白胨斜面培养基上活化16～32h后，转接到液体LB培养基或牛肉膏蛋白胨培养基内摇瓶活化16～32h，作为一级种子液；

(2)液态发酵培养：

将上述一级种子液分别转接到液态发酵培养基中摇床培养16～32h，转速为150～250rpm，培养温度为20～30℃，一级种子液的接种量为液态发酵培养基体积的2％～10％，抗辐射不动杆菌和红平红球菌的有效活菌数为10⁷～10⁹CFU/mL；

(3)固态发酵培养：

将两种细菌的发酵培养液按固态发酵培养基重量5％～10％单独接种在固态发酵培养基中，混匀，于20～30℃下培养2～4天，室温风干，即得单一菌种固态培养物，将两种固态培养物等量混合均匀即制得成品。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征是，步骤(2)中所述液态发酵培养基为：葡萄糖1～3g，豆粕粉为0.5～2g，酵母粉为0.1～1g，K₂HPO₄ 0.11g，CaCl₂ 0.01g，MgSO₄·7H₂O0.15g，MnSO₄ 0.01g，蒸馏水100mL。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征是，步骤(3)中所述固态发酵培养基为高温灭菌后的麸皮与草炭重量比例为0.5～2∶1的混合物，含水量为30％～60％。

6.如权利要求2所述的石油污染土壤修复固体菌剂的应用，其特征是，用于石油或石油产品污染场地的修复处理。

7.如权利要求6所述的应用，其特征是，在进行石油或石油产品污染场地的修复处理时还添加肥料硝基磷酸铵和水。

8.如权利要求7所述的应用，其特征是，所述水的用量为土壤质量的20～50％。