[发明专利]通过提取式发酵减少原料中杂质的毒性作用

权利要求书

1.从包含经工程化而能产生生物产品的微生物细胞的发酵液中被动地相分离毒副产 品的方法，包括：

(a)提供包含粗碳源的含水发酵液；

(b)用所述微生物细胞接种所述发酵液，其中所述微生物细胞经人工改造，提高编码选 自硫酯酶、酰基辅酶A合酶和酯合酶的酶的基因的表达，并且其中所述工程微生物细胞中编 码酰基辅酶A脱氢酶的基因衰减或缺失；以及

(c)培养接种的发酵液，从而产生和分泌生物产品；

其中所述工程微生物细胞产生生物产品，并且所述生物产品是与所述发酵液不混溶的 疏水性溶剂，并且其中存在于所述粗碳源中的毒副产品在所述疏水性溶剂中是可溶的。

2.如权利要求1的方法，还包括：

用初始量的疏水性溶剂预处理所述发酵液；以及

从所述疏水性溶剂中去除所述发酵液。

3.如权利要求2的方法，其中所述预处理步骤包括：

将所述初始量的疏水性溶剂与所述的发酵液以疏水性溶剂:发酵液至多1:1(体积:体 积)的比例混合。

4.如权利要求2的方法，其中所述预处理步骤包括：

将所述初始量的疏水性溶剂与所述的发酵液以疏水性溶剂:发酵液为1:3至1:100(体 积:体积)的比例混合。

5.如权利要求1的方法，还包括：

将一定量的疏水性溶剂引入所提供的发酵液中。

6.如权利要求5的方法，其中引入的一定量的疏水性溶剂是疏水性溶剂:发酵液的比例 为至多1:1(体积:体积)。

7.如权利要求5的方法，其中引入的一定量的疏水性溶剂是疏水性溶剂:发酵液的比例 为从1:3至1:100(体积:体积)。

8.如权利要求1-7中任一项的方法，其中所述的毒副产品包含以下至少一种：糠醛、5- 羟甲基糠醛、脂肪族酸、酚类化合物、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、对苯二酸、儿茶酚、4-甲 基儿茶酚、丁香醛、丁香酸、邻甲氧基苯酚、香草酸、香草醛、1-乙酰基-9H-吡啶并[3,4B]吲 哚、1-乙酰基吡咯烷、2,3-二氢苯并呋喃、2,5-二甲基-4-羟基-3(2H)-furnine、2,5-二甲基 吡嗪、2-羟基-3-甲基-2-环戊烯-1-酮、5,6-二氢-6-戊基-2H-吡喃-4-酮、苯乙酸、苯甲酸、 呋喃羧酸甲基乙基酯、十六烷酸、己酸、戊酸、三甲基吡嗪、呋喃、n-己酸、或4-羧基苯甲醛。

9.如权利要求1-7中任一项的方法，其中所述的疏水性溶剂包含烷烃、酯、烯烃、脂肪 酸、脂肪醇、醛或酮。

10.如权利要求1-7中任一项的方法，其中所述的疏水性溶剂包含十六烷、二十碳十烯、 C1C12:0酯、C1C12:1酯、C1C14:0酯、C1C14:1酯、C1C16:0酯、C1C16:1酯、C1C18:1酯、C2C12:0 酯、C2C12:1酯、C2C14:0酯、C2:C14:1酯、C2C16:0酯、C2C16:1酯、C2:C18:1酯或生物柴油。

11.如权利要求1-7中任一项的方法，其中所述的生物产品包含烷烃、酯、烯烃、脂肪酸、 脂肪醇、醛或酮。

12.如权利要求1-7中任一项的方法，其中所述的生物产品包含十六烷、二十碳十烯、 C1C12:0酯、C1C12:1酯、C1C14:0酯、C1C14:1酯、C1C16:0酯、C1C16:1酯、C1C18:1酯、C2C12:0 酯、C2C12:1酯、C2C14:0酯、C2:C14:1酯、C2C16:0酯、C2C16:1酯、C2:C18:1酯或生物柴油。

13.如权利要求1-7中任一项的方法，其中所述的生物产品是生物燃料。

14.如权利要求2-7中任一项的方法，其中所述的疏水性溶剂和所述的生物产品是相似 的分子。

15.如权利要求1-7中任一项的方法，其中所述的粗碳源源自生物质。