[发明专利]5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-4-(4-吗啉-4-基甲基-苯基)-异唑-3-甲酸乙基酰胺的酸加成盐、水合物和多晶型物以及包含这些形式的制剂

说明书

本发明涉及5-(2，4-二羟基-5-异丙基-苯基)-4-(4-吗啉-4-基甲基-苯基)- 异噁唑-3-甲酸乙基酰胺的新的盐形式和多晶型物，涉及此类新的盐形式的 水合物和多晶型物，以及涉及包含此类盐形式的新的制剂。

分子伴侣的Hsp90家族包含四个已知的成员：在细胞溶胶中的Hsp90α 和Hsp90β、在内质网中的grp94以及在线粒体中的trap-1。Hsp90是要求 变性或“未折叠”的蛋白的ATP依赖性重折叠和涉及细胞对细胞外因素的 生长响应的多种关键蛋白的构象成熟的一类丰富的细胞分子伴侣。这些蛋 白(称为客户蛋白(client protein))包括类固醇受体和多种蛋白激酶。Hsp90 对于真核细胞存活非常重要并且在很多肿瘤中过表达。癌细胞似乎对于 Hsp90ATP酶的活性的短暂抑制敏感，这表明Hsp90抑制剂可以具有作为 新的抗癌药物的潜力。每个Hsp90家族成员在其N末端区域具有保守的 ATP结合位点，该结合位点在其它ATP结合蛋白中很少发现。Hsp90的 弱ATP酶活性被其与多种共分子伴侣蛋白的相互作用刺激。数种天然的化 合物例如格尔德霉素或根赤壳素在Hsp90的ATP结合位点结合，抑制其 ATP酶活性。在细胞体系和体内，这些基于与Hsp90结合的药物防止了客 户蛋白的折叠，然后其在蛋白酶体中降解。17-烯丙基氨基-17-去甲氧基- 格尔德霉素(17-AAG)(格尔德霉素衍生物)在I期临床试验中试验。17-AAG 最初的临床经验提供了初步的证据证明在预临床体系中与活性相关的药物 浓度可以在人类中获得，具有可耐受的毒性，并且提供了在至少某些替代 和肿瘤区室中靶向调节的早期证据。17-AAG的剂量限制毒性是肝毒性。 17-AAG的溶解度差使得其很难配制/施用并且其合成困难(其通常通过发 酵获得)。因此需要具有更好的理化性质并且可能具有更高的特异性 (17-AAG抑制所有这四种Hsp90种内同源基因)的替代化合物。WO 2004/072051公开了此类替代化合物，更特别的是一系列异噁唑衍生物， 其对于热休克蛋白具有抑制性质。

5-(2，4-二羟基-5-异丙基-苯基)-4-(4-吗啉-4-基甲基-苯基)-异噁唑-3-甲 酸乙基酰胺是Hsp90抑制剂，其在WO 2004/072051(实施例78)中描述。 化合物可以例如如该公布中公开的制备。5-(2，4-二羟基-5-异丙基-苯 基)-4-(4-吗啉-4-基甲基-苯基)-异噁唑-3-甲酸乙基酰胺是水溶性差的化合 物，其在水中显示出溶解度小于0.1mg/mL。在0.1N HCl中游离碱的溶 解度为约1-2.5mg/mL。另外，游离碱略微吸湿，其在80％相对湿度(r.h.)、 25℃下显示出最大吸收为1.8％的水。

令人惊奇的是，发现的5-(2，4-二羟基-5-异丙基-苯基)-4-(4-吗啉-4-基甲 基-苯基)-异噁唑-3-甲酸乙基酰胺的新的盐形式包括盐酸盐、酒石酸盐、磷 酸盐、半富马酸盐和甲磺酸盐。发现这些盐和游离碱可以结晶，使得这些 形式特别适合用于药物开发。

发现5-(2，4-二羟基-5-异丙基-苯基)-4-(4-吗啉-4-基甲基-苯基)-异噁唑 -3-甲酸乙基酰胺甲磺酸盐和5-(2，4-二羟基-5-异丙基-苯基)-4-(4-吗啉-4-基 甲基-苯基)-异噁唑-3-甲酸乙基酰胺盐酸盐都不具有吸湿性。

另外，发现5-(2，4-二羟基-5-异丙基-苯基)-4-(4-吗啉-4-基甲基-苯基)- 异噁唑-3-甲酸乙基酰胺甲磺酸盐与游离碱以及其它盐在溶解度方面比较 具有优越性。除了显示出高水溶解度的优点外，甲磺酸盐还适合以明确的 酸碱比例可重复制备。这个发现使得甲磺酸盐特别适合在用于口服以及用 于静脉内制剂的液体制剂中应用。

与游离碱相比，所有的5-(2，4-二羟基-5-异丙基-苯基)-4-(4-吗啉-4-基甲 基-苯基)-异噁唑-3-甲酸乙基酰胺盐均显示出更高的溶解度。

盐酸盐在水中的溶解度为2.5-5mg/mL，在pH 5时，溶解度为约1-2.5 mg/mL并且在0.1N HCl中溶解度小于1mg/mL。

酒石酸盐在水中的溶解度大于2mg/mL。

磷酸盐在水中的溶解度为约0.5-1.0mg/mL。

半富马酸盐在水中的溶解度为约0.1-0.25mg/mL。