[发明专利]白藜芦醇或柚皮素预防和治疗糖尿病肾病的应用

说明书

技术领域

本发明涉及白藜芦醇或柚皮素的应用，特别涉及白藜芦醇或柚皮素通过降低体内转化生长因子-β1(transforming growth factor betal，简称TGF-β1)的水平在预防和治疗糖尿病肾病中的应用。

背景技术

糖尿病发病率未来10年全球有增多趋势，其中威胁生命的糖尿病肾病是西方国家糖尿病死亡的主导原因，也正成为亚洲及发展中国家未来糖尿病死亡的主要原因。当前，降低糖尿病肾病危险性的措施主要是严格控制血糖、高血压和限制饮食中的蛋白摄取等，可降低20％由肾衰竭导致的死亡危险率。

糖尿病肾病表现为肾小球功能和结构改变，包括肾小球滤过性增高、肾小球基底膜增厚、细胞外基质扩充到肾小球系膜区域等。另外，肾小管病变在三分之一的II型糖尿病患者中也很突出。临床和动物实验均证明TGF-β与糖尿病肾病综合症的发展密切相关，临床发现糖尿病肾病患者肾小球和肾小管腔室中TGF-βmRNA及其蛋白水平均表达升高，链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠和小鼠肾脏中，也有TGF-βmRNA表达及其蛋白水平的升高，体外细胞培养中，高糖对来源于肾小球和肾小管腔室的多种细胞系也均有刺激TGF-β升高作用。另外，转导过表达TGF-β可使小鼠发生严重的肾损害，同时伴随肾纤维化；在肝脏转导过表达TGF-β1也使小鼠出现进展性肾损害，同时血液中存在较高浓度的激活TGF-β1。相反，用抗体或反义RNA措施阻止TGF-β可以改善小鼠的糖尿病器官损伤。

白藜芦醇和柚皮素是植物中普遍存在的有效成分，尤其在葡萄及其制成品中含量较高，具有抗菌、消炎、清除自由基、抗肿瘤等多种药理作用。但现有技术中还未发现白藜芦醇、柚皮素具有可以降低糖尿病小鼠血清及肾脏组织中TGF-β1的水平并减轻糖尿病小鼠肾脏损害的作用。

发明内容

本发明的一个目的在于公开白藜芦醇和柚皮素的应用；本发明的另一个目的在于公开白藜芦醇和柚皮素抑制体内转化生长因子-β1水平升高预防或治疗糖尿病肾病的应用。

本发明揭示了白藜芦醇、柚皮素等天然黄酮类小分子化合物在降低糖尿病引起的体内TGF-β1水平升高中的应用，及在预防和治疗糖尿病肾病的应用。

附图说明

图1：白藜芦醇和柚皮素等黄酮类化合物对糖尿病小鼠血清TGF-β1的影响

图2：白藜芦醇和柚皮素等黄酮类化合物对糖尿病小鼠肾脏TGF-β1的影响

图3：白藜芦醇和柚皮素等黄酮类化合物对四氧嘧啶型I糖尿病小鼠血糖的影响

图4：白藜芦醇和柚皮素等黄酮类化合物对链脲佐菌素II型糖尿病小鼠血糖的影响

图5：白藜芦醇和柚皮素等黄酮类化合物对四氧嘧啶I型糖尿病小鼠饮水量的影响

图6：白藜芦醇和柚皮素等黄酮类对链脲佐菌素II型糖尿病小鼠饮食量的影响

图7：白藜芦醇和柚皮素等黄酮类对I型糖尿病小鼠肌酐清除率的影响

图8：白藜芦醇和柚皮素等黄酮类对I型糖尿病小鼠尿白蛋白的影响

图9：白藜芦醇和柚皮素等黄酮类对I型及II型糖尿病的预防作用

图10：白藜芦醇和柚皮素等黄酮类化合物对正常小鼠糖耐受量的影响

下面的动物实验研究进一步说明了本发明中白藜芦醇和柚皮素抑制TGF-β1用于预防和治疗糖尿病肾病的有效作用：

实验例1 白藜芦醇和柚皮素等对四氧嘧啶诱导的小鼠I型糖尿病的治疗作用。

实验方法：将四氧嘧啶80mg/kg尾静脉注射于体重20±1g的昆明小鼠，每周1次，共注射2次。末次注射后1周，尾端采血测定空腹血糖，以空腹血糖大于13mmol/L的小鼠为I型糖尿病小鼠。

将入选小鼠按血糖高低随机分组：模型对照组：静脉注射或灌胃给予等容量溶剂；治疗组：灌胃给药，白藜芦醇50mg/kg，柚皮素、柚皮苷、橙皮素、染料木素和木犀草素均100mg/kg，每组10只小鼠，雌雄各半，每日给药1次，每日测量小鼠的进食量及饮水量，绘出小鼠的每周饮食量、饮水量的变化曲线，连续10周。第6周、第10周治疗结束时各测1次空腹血糖(禁食12h以上)，治疗结束时检测肾肌酐清除率和尿白蛋白含量以评价肾脏损害，之后眼眶静脉采血分离血清，随后将小鼠处死，切除肾脏，用PBS匀浆后离心取上清用于测组织TGF-β1。血清及组织TGF-β1用ELISA试剂盒检测，尿白蛋白含量用免疫散射速率比浊法试剂盒测定，血肌酐量用碱性苦味酸法试剂盒测定。