[发明专利]一种毒死蜱农药降解菌、其菌剂和制备方法有效
申请号: | 200810215259.2 | 申请日: | 2008-09-18 |
公开(公告)号: | CN101469313A | 公开(公告)日: | 2009-07-01 |
发明(设计)人: | 胡美英;钟国华;高燕 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A62D3/02;C12R1/645;A62D101/04 |
代理公司: | 广州粤高专利代理有限公司 | 代理人: | 林丽明 |
地址: | 510642广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 毒死 农药 降解 制备 方法 | ||
1.一种采用毒死蜱农药降解菌制备降解菌剂的方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)将毒死蜱农药降解菌Hu-01的菌种在培养皿上活化,接种于试管斜面;所述毒死蜱农药降解菌Hu-01为枝孢菌属Cladosporium sp.的Hu-01菌株,菌种保藏号为CCTCC M 207111;
(2)将毒死蜱农药降解菌Hu-01的斜面种接种于查彼氏培养基摇瓶中,振荡培养至对数期;
(3)将步骤(2)菌种按照8%~10%的接种量种入种子罐,培养至对数生长期;所述种子罐培养条件为无菌空气的通气量为45~60L/min,搅拌速度为200~300转/分,温度28℃;所述种子罐所用的培养基配方为NaNO3 0.2%,K2HPO4 0.1%,KCl 0.05%,MgSO4 0.05%,Fe2(SO4)3 0.001%,蔗糖3%,蛋白胨0.5%;所述种子罐按容积量80%投料,投料完成后在1.1kg/cm3的压力、121℃条件下灭菌,冷却至28℃后备接种;
(4)将到达对数期种子液按照8%~10%的接种量接种入生产罐培养;所述生产罐的培养条件是无菌空气的通气量为0.45~0.60m3/min,搅拌速度为100~200转/分,培养温度为26~30℃,培养时间为88~96小时;所述生产罐所用的培养基配方为NaNO3 0.2%,K2HPO4 0.1%,KCl 0.05%,MgSO4 0.05%,Fe2(SO4)3 0.001%,蔗糖3%,蛋白胨0.5%;所述生产罐按照投料量:容量=0.08~0.1∶1的比例投料,投料后在1.1kg/cm3的压力、121℃条件下灭菌,冷却至28℃后,通无菌空气保持无菌状态备接种;
(5)培养液经离心取上清得菌液,菌液立即加入保护剂,分装成液体剂型;所述保护剂组成为氯化钠质量分数为0.7%,甘氨酸质量分数为0.35%,苯甲酸钠质量分数为0.03%,凯松体积分数为0.17076%,甘油的体积分数为8.37801%。
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