[发明专利]一种金钗石斛多糖提取物的制备方法及其用途

说明书

技术领域

本发明属中药提取物，具体涉及一种金钗石斛多糖提取物制备方法及其应用。

背景技术

石斛是常用名贵中药材，为兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium Sw.)多种植物的新鲜或干燥茎的统称。石斛属是兰科植物中一个较大的属，全世界约1100种，我国有约76种。石斛始载于《神农本草经》，被列为上品，具有滋阴清热、益胃生津、润肺止咳等功效。《中国药典》2005年版收载了金钗石斛(D.nobileLindl.)、铁皮石斛(D.officinale Kimura et Migo)和马鞭石斛(D.fimbriatum Hook.)三种。

现代化学药理研究表明，金钗石斛主要含有多糖类，生物碱类，酚类等活性物质，其中多糖类成分具有抑制肿瘤，增强或恢复免疫功能，降血糖等作用。目前石斛多糖的研究存在物质基础不明确，质量不可控，分离纯化工艺粗糙等弊端，缺乏活性成分含量高，化学成分明确，药效活性显著的文献及专利报道。而且，市面上也未见关于金钗石斛多糖的药物或药物组合物的出现。

发明内容

本发明的目的是提供一种金钗石斛多糖提取物的制备方法，所述的金钗石斛多糖提取物中主要含有多糖，其中，以重量百分比计，多糖的含量为90％以上。优选多糖的含量为93％-98％。通过以下步骤实现：

(1)脱脂：取金钗石斛饮片，用8-15倍量有机溶剂浸泡后回流1-3次，过滤，挥干有机溶剂得药渣；

(2)提取：上述药渣加水浸泡后，水浴提取1-3次，每次1-3小时，过滤，浓缩滤液至每ml相当于含生药0.5-2.0g；

(3)醇沉：向上述浓缩液中加入适量乙醇，冰浴放置，过滤，沉淀冷冻干燥后得多糖提取物粗品I；

(4)除蛋白：取上述多糖提取物粗品I适量溶于水中，加入体积比为5：1的氯仿：正丁醇，搅拌后分层，上层重复操作4-8次后，加入适量乙醇，冰浴放置，过滤，沉淀冷冻干燥，得多糖提取物粗品II；

(5)除单糖及寡糖：取上述多糖提取物粗品II适量溶于水中，用透析膜(截止分子量：8000-14000)透析2天后，取出透析袋内液体加入适量乙醇，冰浴放置，过滤，沉淀冷冻干燥后得多糖提取物粗品III；

(6)凝胶柱纯化：将上述多糖提取物粗品III用凝胶色谱柱纯化，用硫酸苯酚法跟踪馏分，收集主峰合并后，加入适量乙醇，冰浴放置，过滤，沉淀冷冻干燥，得白色金钗石斛多糖提取物。

步骤(1)所述的有机溶剂为石油醚，乙酸乙酯，乙醇或高浓度乙醇水溶液。

步骤(2)所述的药渣加水浸泡，其中加水量为药渣的4-10倍量，优选8-10倍量；提取温度为30-80℃，优选的为40-60℃。

步骤(3)-(6)中所述的加入乙醇后，乙醇的体积百分含量为50％-80％，优选的乙醇的体积百分含量为70％-80％。

步骤(4)-(6)中所述的冰浴放置时间为12小时以上，优选的冰浴放置24小时。

本发明的另一个目的是提供所述的金钗石斛多糖提取物在制备治疗和预防心血管疾病药物中的应用。

所制备的药物还含有制剂允许的药物赋形剂或载体。

本发明的有益之处是提取的石斛多糖的质量可控，提取的活性成分含量高，化学成分明确，药效活性显著。本发明提取物的制备方法的分离纯化工艺设计合理，操作简便。本发明提供的药物或药物组合物的出现，为金钗石斛多糖提供了广泛的医药用途。

具体实施方式

下面将结合实施例进一步说明本发明的实质内容和有益效果，该实施例仅用于说明本发明而非对本发明的限制。

实施例一 金钗石斛多糖提取物的制备