[发明专利]一种单克隆抗体涂层生物支架的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物支架制备领域，具体地说，涉及一种单克隆抗体 涂层生物支架的制备方法。

背景技术

1976年德国学者安德里亚·格隆茨戈首次提出了动脉内安装支架 的设想，到90年代冠状动脉支架已广泛地应用于临床治疗。血管支 架是心血管及外周血管阻塞病变进行介入治疗的主要手段，其特点是 能通过细小管道进入预定的部位，释放后能膨胀至设定的直径大小， 对管腔起到支撑作用，使管腔保持通畅。血管支架按照表面状态可分 为裸支架、药物洗脱支架、聚合物包被支架、金属涂层支架、放射性 支架和人造血管覆盖支架，最先使用的支架基本为裸支架。由于支架 相对血管或其它肌体管道来说是一种异源性物质，安放后刺激血管内 膜引起反应性增生，使血管发生再狭窄。再狭窄的发生率高达 30％-35％，尤其是病变较长的血管和直径较小的血管。为解决再狭窄 的问题，人们随后开发出放射性支架和药物洗脱支架，其中药物洗脱 支架已被公认为在冠心病的介入治疗中，是能够解决冠脉血管内再狭 窄问题的最有效的方法。

现有的药物洗脱支架多采用聚合物作为载体来携带药物并控制 其释放，典型的作法是：将活性药物和聚合物混合涂覆在裸支架部分 或全部表面上，聚合物一般最少要占涂层质量的70％以上才能起到载 体的作用，支架本体上涂覆一层包含活性药物的聚合物涂层，聚合物 涂层上又涂覆一层多聚物涂层。这种含有聚合物涂层的药物支架在临 床应用中可以将再狭窄发生率降低到10％以下，这种支架在植入人体 后，由于药物的不断减少而聚合物浓度相应的不断增高，可能导致血 栓的形成。

现有的药物洗脱支架的药物多采用雷帕霉素或者紫杉醇作为支 架上所携带药物，但该种带有聚合物涂层的药物洗脱支架，但仍不能 从根本上很好的解决支架内血栓形成和再狭窄问题，存在手术后再狭 窄率高、血栓源性强等缺陷，远期效果不理想，目前研究表明这种药 物洗脱支架的还存在10％左右再狭窄率，为了减少再狭窄率，本发明 研究人员开发了一种单克隆抗体生物支架。该生物支架具有很好的促 进血管内皮化和抑制血栓形成，以及抑制血管平滑肌的生长和增值的 作用，单克隆抗体或单克隆抗体和其它药物治疗剂联合支架具有二种 药物的优点，在预防血管再狭窄，血栓形成，促进内皮化和抑制平滑 肌再生都具有优良的性能。

发明内容

本发明的目的是提供一种单克隆抗体涂层生物支架的制备方法。

本发明所提供的单克隆抗体涂层生物支架的制备方法，以支架本 体为阳极，通过静电喷涂或阳极极化的方式使得抗体溶液带负电，在 电场力的作用下，向阳极移动，均匀地涂覆在生物支架的表面。所述 支架本体的表面还可制成有直径100-800nm的孔洞。

上述采用静电喷涂的方式涂覆生物支架，其包括如下步骤：

(1)支架本体的预处理：用四氢呋喃超声清洗，超声波频率为 28-100KHz，清洗时间为5-15min；使用去离子水进行清洗三次；

(2)抗体涂覆液的配制：以纯水或者浓度为0.01-1.0mol/l、pH 值为9.6的碳酸盐缓冲溶液为溶剂，加入浓度为0.01-1.0mg/ml的抗体 溶液；

(3)静电喷涂：以抗体溶液为阴极，接上电源负高压，以支架 本体为阳极，接地，两极形成高压静电场，由于在阴极产生电晕放电， 使喷出的抗体溶液介质带电，并进一步雾化，沿电力线定向地流向带 正电的被涂物支架本体表面，中和沉积成一层均匀、附着牢固的抗体 涂层。

静电喷涂的原理：以抗体溶液作为阴极，接上电源负高压，而支 架接地，这样在两极就形成了高压静电场。由于在阴极产生电晕放电， 可使喷出的抗体溶液介质带电，并进一步雾化。按“照同性相斥，异 性相吸”的原理，已带电的溶液介质受电场力(F＝qE)作用，沿电力线 定向地流向带正电的被涂物支架表面，就可中和沉积成一层均匀、附 着牢固的抗体涂层。

上述采用阳极极化的方式涂覆生物支架，其包括如下步骤：

(1)支架本体的预处理：用四氢呋喃超声清洗，超声波频率为 28-100KHz，清洗时间为5-15min；使用去离子水进行清洗三次；

(2)抗体涂覆液的配制：以纯水或者浓度为0.01-1.0mol/l、pH 值为9.6的碳酸盐缓冲溶液为溶剂，加入浓度为0.01-1.0mg/ml的抗体 溶液；