[发明专利]一种单克隆抗体涂层生物支架的制备方法

权利要求书

1.一种单克隆抗体涂层生物支架的制备方法，其特征在于，通过阳极极化的方式，以支架本体为阳极，在电场力的作用下，带负电的抗体离子向阳极移动，均匀地涂覆在生物支架的表面，其中所述支架本体表面制成有直径100-800nm的孔洞；所述支架本体采用316医用不锈钢材质或钴铬合金材质；所述单克隆抗体为单克隆抗体CD34、单克隆抗体CD133、单克隆抗体CD105、单克隆抗体CD117、单克隆抗体CD123、单克隆抗体CD9+、达利珠单抗、或阿昔单抗中的一种或多种； 

采用阳极极化的方式涂覆生物支架，其包括如下步骤： 

(1)支架本体的预处理：用四氢呋喃超声清洗，超声波频率为28-100KHz，清洗时间为5-15min；使用去离子水进行清洗三次； 

(2)抗体涂覆液的配制：以纯水或者浓度为0.01-1.0mol／L、pH值为9.6的碳酸盐缓冲溶液为溶剂，加入浓度为0.01-1.0mg／ml的抗体溶液； 

(3)阳极极化：以支架本体作为阳极，溶液中采用单克隆抗体溶液时，该抗体电离变为阴离子，通电后抗体向阳极支架本体处移动，使单克隆抗体与支架本体表面牢固均匀地结合，附着牢固的抗体涂层。 

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述支架本体经过表面清洗和防腐处理后，进行阳极极化的涂覆处理；所述涂覆后的生物支架自然晾干，经预冷冻后，放入真空冷冻干燥机干燥。 

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述支架本体的表面清洗过程为： 

(1)用砂带打磨支架本体表面，用于去除表面的氧化物，调整表面粗糙度； 

(2)利用超声波，依次用75％的医用乙醇溶液、99.5％的丙酮溶 液、去离子水清洗，超声波频率为28-100KHz，清洗时间为5-15min； 

(3)将支架本体放入15-60g／L、70-100℃的氢氧化钠溶液中浸泡5-10min，用于去除油脂和氧化皮； 

(4)将清洗后的支架本体放置在真空干燥机中，温度设定在30-40℃，干燥30-60min后取出。 

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述支架本体的防腐处理采用化学氧化处理或阳极氧化处理的方法进行。 

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述化学氧化处理的过程为：将支架本体浸入含重铬酸钾15-20g/L、硝酸15-25g／L、氯化钠0.75-1.25g／L的混合溶液中，在70-80℃下，氧化0.5-2.0min；所述阳极氧化处理的过程为：采用交流电氧化，在两电极上分别安装完全相同的支架本体，阳极氧化处理用槽液为高锰酸钾15-20g／L、磷酸三钠15-55g／L、氟化钾25-55g／L、氢氧化钾65-165g／L、氢氧化铝15-65g／L的混合液，在20-60℃下，电流密度为0.1-10A／dm²，交流电压为50-90V下，氧化10-50min。