[发明专利]一种试剂盒以及用其检测ATP含量、酶和药物的方法

权利要求书

1.一种试剂盒  ，该试剂盒包括由噻咯季铵盐和缓冲液组成的混合溶液以及ATP，所述的缓冲液选自Tris-HCl缓冲液、磷酸盐缓冲液、Tris-EDTA缓冲液、Mes缓冲液和HEPES缓冲液中的一种，所述的噻咯季铵盐在所述的混合溶液中的浓度为3×10^-5-1×10^-4mol/l，其具有如下式(I)所示分子式：

式中X为Cl、Br、I，取代基R为C₁-C₁₀的直链烷基。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中式(I)中X为I，取代基R为C₁-C₅的直链烷基。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其中式(I)中的取代基R为甲基。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其中的噻咯季铵盐在所述的混合溶液中的浓度为5×10^-5-8×10^-5mol/l。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其中的噻咯季铵盐在所述的混合溶液中的浓度为8×10^-5mol/l。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的试剂盒，其中所述的混合溶液中噻咯季铵盐和所述的缓冲液的摩尔比为1∶100-3500。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其中所述的混合溶液中的噻咯季铵盐和所述的Tris-HCl缓冲液的摩尔比为1∶125。

8.根据权利要求1-5中任一项所述的试剂盒，其中所述的混合溶液中缓冲液的pH值为5-9。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其中所述的混合溶液中缓冲液的pH值为7-9。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其中所述的混合溶液中缓冲液的pH值为9。 

11.一种利用权利要求1-5、7、9、10中任一项所述的试剂盒检测待测物中ATP含量的方法，该方法包括以下步骤：

a.将所述试剂盒中的由噻咯季铵盐和所述缓冲液组成的混合溶液与ATP进行混合，得到ATP浓度在8.0×10^-6mol/l以内的多个浓度的ATP混合溶液；

b.测定步骤a得到的多个浓度的ATP混合溶液的荧光强度值，绘制ATP溶液浓度与荧光强度之间的标准关系曲线；

c.提取待测物中的ATP，将得到的ATP加入到所述试剂盒中的由噻咯季铵盐和所述缓冲液组成的混合溶液中，测定所得溶液的荧光强度值，根据步骤b中绘制的标准关系曲线获得待测物中ATP的含量。

12.一种利用权利要求1-5、7、9、10中任一项所述的试剂盒检测酶的方法，所述的酶是对ATP有水解作用的酶或在生化过程中利用ATP的酶，该方法包括以下步骤：

a.将所述试剂盒中的由噻咯季铵盐和所述缓冲液组成的混合溶液与ATP进行混合；

b.向步骤a得到的混合溶液中添加待测酶，检测加入后多个时间的荧光强度值；

c.如果荧光强度值随着时间的推移不断减少，这表明步骤b中添加的待测酶是对ATP有水解作用的酶或在生化过程中利用ATP的酶。

13.一种利用权利要求1-5、7、9、10中任一项试剂盒检测药物的方法，所述的药物是对酶有抑制作用的药物，所述的酶是对ATP有水解作用的酶或在生化过程中利用ATP的酶，该方法包括以下步骤：

a.将所述试剂盒中的由噻咯季铵盐和所述缓冲液组成的混合溶液与ATP进行混合；

b.向步骤a得到的混合溶液中同时添加待测药物和所述的酶，检测加入后多个时间的荧光强度值；

c.如果荧光强度值随着时间的推移不发生变化，这表明步骤b中添加的待测药物是对所述酶有抑制作用的药物。