[发明专利]圆齿野鸦椿茎段的组织培养方法

说明书

技术领域

本发明属于经济林的栽培方法，特别是涉及药用、观赏植物圆齿野鸦椿组织培养方法。

背景技术

圆齿野鸦椿(Euscaphis konishii Hayata)为省沽油科野鸦椿属常绿小乔木，种子油可制肥皂；树皮可制栲胶；根、果性温，味微苦。祛风除湿，止血止痛，发表散寒。根治产褥热，跌打损伤；果治睾丸肿痛，子宫脱垂。圆齿野鸦椿具有观花、观叶和赏果的效果，观赏价值高。挂果时间长，从9月下旬外果皮变红到翌年3月果实脱落，观果时间长达半年，红色艳丽的瞢荚果给秋冬季节增添了许多喜庆色彩，使人陶醉。野鸦椿作为观赏树种，应用范围广，可群植、丛植于草坪，也可用于庭园，公园等地布景。但由于圆齿野鸦椿的种子有深休眠的特点，从采种到播种出苗跨度3年，而且出苗率低，要能获得优良的发芽率，获得更多的健壮苗。对种子进行沙藏催芽；江西农业大学等单位开展了播种繁育方法研究，但其发芽率在65％左右，具备很好的实用前景，但仍然较低，没能符合生产实际需要。生产中，特别大规模药用价值的开发时，更需要是能够满足大面积种植的优良纯化的组培苗，因此急需要成熟的组织培养技术，但在专利公开以前没有一个有关其组织培养的报道，更没有成功的实例。

发明内容

本发明的目的是提供一种圆齿野鸦椿茎段的组织培养方法。

本发明的方法是以如下方式实现的：

1.取材方法：选取当年萌发饱满新芽、或带芽饱满的当年生茎段，在距离带芽节点1-2厘米处剪取，去除多余的叶片和2/3叶柄；用洗衣粉漂洗干净后，用自来水滴冲3-5小时；

2.培养基：

培养基的配制：基本培养基为MS，Ag，Su，pH值为5.8，生长激素为BA、IBA、KT、NAA、IAA、Zu，附加物为Ac等；培养基的厚度一般为1cm左右；

诱导培养基→MS+BA(2mg/L)+NAA(0.3mg/L)+Su(20g/L)+Ag(7g/L)+Ac(2～2.5g/L)

诱导培养基→MS+Zu(2～5mg/L)+IAA(1mg/L)+NAA(0.3mg/L)+Su(39g/L)+Ag(0.7g/L)

生根培养基→1/2MS+IBA(0.5mg/L)+Su(20g/L)+Ag(7g/L)

3.材料消毒处理：先对材料进行适当的修剪，用洗衣粉清洗材料，再将材料放入干净的烧杯中用自来水冲洗30分钟，把水沥干置超净工作台备用，用75％的酒精盖过材料，摇荡，3-5秒钟后去除酒精，加入0.1％升汞(HgCl₂)处理12分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水冲洗材料2-3次后，倒去无菌水即可进行接种；

4.诱导培养：取生长健壮的新芽切割成约0.5～1.5cm的茎段，削除新芽、表皮以及残留的芽外壳，保留2/3新芽幼嫩叶柄以保护腋芽，分别接种在诱导培养基中；

5.培养条件：光照时间：12～16h/d光照强度：1500-2000lx温度：24℃±1℃

6.增殖培养：将上述诱导培养、生长健壮的丛生芽切割开，分别接种在增殖培养基中；

7.诱导生根：将继代诱导培养出来的幼苗切取单株，带有2-3片叶子，株高1-2cm，转移至生根培养基中；

8.小苗移栽：当试管苗长至3～4cm高，叶子有5～7片，根有3～5条，长度约2～3cm时，就可进行移栽；先把要移栽的苗搬移到培养室外，炼苗3～5天，以增强试管苗对室外环境的适应能力；然后打开瓶盖锻炼2～3天，再从培养瓶中取出，洗去根部培养基，移入蛭石和腐殖土(1∶2)混合的基质中，小苗移栽后放入室温中，保湿遮阴。

采用本发明方法进行，茎段经过培养，20～25天即可以萌发出生长健壮的新芽；再经过20～30天左右的扩增，15～20天左右诱导生根后即可成苗、移栽，移栽成活率可达90％以上；成活后的长势良好、株形健壮挺拔，扩繁系数在15倍以上。

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

具体实施例

实施例1：

取材方法：选取当年萌发饱满新芽、或带芽饱满的当年生茎段，在距离带芽节点1-2厘米处剪取，去除多余的叶片和2/3叶柄；用洗衣粉漂洗干净后，用自来水滴冲3小时；

培养基：

培养基的配制：基本培养基为MS，Ag，Su，pH值为5.8，生长激素为BA、IBA、KT、NAA、IAA、Zu，附加物为Ac等；培养基的厚度一般为1cm左右；

诱导培养基→MS+BA(2mg/L)+NAA(0.3mg/L)+Su(20g/L)+Ag(7g/L)+Ac(2.5g/L)