[发明专利]圆齿野鸦椿茎段的组织培养方法

权利要求书

1、圆齿野鸦椿茎段的组织培养方法，其特征是：

1)取材方法：选取当年萌发饱满新芽、或带芽饱满的当年生茎段，在距离带芽节点1-2厘米处剪取，去除多余的叶片和2/3叶柄；用洗衣粉漂洗干净后，用自来水滴冲3-5小时；

2)培养基：

培养基的配制：基本培养基为MS，Ag，Su，pH值为5.8，生长激素为BA、IBA、KT、NAA、IAA、Zu，附加物为Ac等；培养基的厚度一般为1cm左右；

诱导培养基→MS+BA(2mg/L)+NAA(0.3mg/L)+Su(20g/L)+Ag(7g/L)+Ac(2～2.5g/L)

诱导培养基→MS+Zu(2～5mg/L)+IAA(1mg/L)+NAA(0.3mg/L)+Su(39g/L)+Ag(0.7g/L)

生根培养基→1/2MS+IBA(0.5mg/L)+Su(20g/L)+Ag(7g/L)

3)材料消毒处理：先对材料进行适当的修剪，用洗衣粉清洗材料，再将材料放入干净的烧杯中用自来水冲洗30分钟，把水沥干置超净工作台备用，用75％的酒精盖过材料，摇荡，3-5秒钟后去除酒精，加入0.1％升汞(HgCl₂)处理12分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水冲洗材料2-3次后，倒去无菌水即可进行接种；

4)诱导培养：取生长健壮的新芽切割成约0.5～1.5cm的茎段，削除新芽、表皮以及残留的芽外壳，保留2/3新芽幼嫩叶柄以保护腋芽，分别接种在诱导培养基中；

5)培养条件：光照时间：12～16h/d光照强度：1500-2000lx温度：24℃±1℃

6)增殖培养：将上述诱导培养、生长健壮的丛生芽切割开，分别接种在增殖培养基中；

7)诱导生根：将继代诱导培养出来的幼苗切取单株，带有2-3片叶子，株高1-2cm，转移至生根培养基中；

8)小苗移栽：当试管苗长至3～4cm高，叶子有5～7片，根有3～5条，长度约2～3cm时，就可进行移栽；先把要移栽的苗搬移到培养室外，炼苗3～5天，以增强试管苗对室外环境的适应能力；然后打开瓶盖锻炼2～3天，再从培养瓶中取出，洗去根部培养基，移入蛭石和腐殖土(1∶2)混合的基质中，小苗移栽后放入室温中，保湿遮阴。