[发明专利]尿细胞微量染色分析方法有效
申请号: | 200810040597.7 | 申请日: | 2008-07-15 |
公开(公告)号: | CN101629946A | 公开(公告)日: | 2010-01-20 |
发明(设计)人: | 彭艾;王力生;夏红根 | 申请(专利权)人: | 彭艾;王力生;夏红根 |
主分类号: | G01N33/493 | 分类号: | G01N33/493;G01N1/30 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人: | 吴桂琴 |
地址: | 200032上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 微量 染色 分析 方法 | ||
1.一种尿细胞微量染色分析装置,其特征是所述分析装置包括尿样本细胞分离装置、尿 细胞密度梯度离心采样装置、自动制片装置、自动染色装置和染色液处理装置、高清晰 度CCD图像采集器、高分辨率彩色数字自动显微镜平台和显微镜、计算机控制系统及 控制软件、LCD彩色显示屏和彩色打印机;其中,所述尿细胞密度梯度离心采样装置由 尿细胞采集器、开关、橡皮塞、空气金属导管、自动控制流量和控制塞组成,所述尿细 胞密度梯度离心采样装置内装有不同浓度的Ficoll液;所述自动制片装置由底座、支架、 一次性塑料细胞甩片器、甩片器固定装置、圆形橡皮圈、载玻片螺旋固定器、载玻片、 废液箱、开关、高密度Ficoll尿细胞混合液、废液流出管道和载玻片细胞孔组成;所述 自动染色装置由进气装置、空气槽、染液槽、载玻片转盘、控制面板、电机、水漕、微 量染剂移液器、排风装置、过滤装置、输液管和清水槽组成;所述自动染色装置在玻片 染色控制软件控制下进行染片;所述玻片染色控制软件由全局时间轴构成,并引入基于 遗传算法的概率搜索模块;所述全局时间轴采用以单个染色动作为最小处理结点的链表 结构,逻辑上标记每个时刻系统的染色行为,并由一组函数提供插入、查询操作的接口; 所述遗传算法是在全局时间轴的基础上,构建的恰当的调度顺序。
2.权利要求1所述的尿细胞微量染色分析装置,其特征是所述尿样本细胞分离装置由滤 网灌注器、滤网和滤网支撑点构成;其中的滤网为30~300目。
3.权利要求1或2所述的尿细胞微量染色分析装置,其特征是以所述尿细胞微量染色分 析装置进行的尿细胞微量染色分析包括下述步骤:
1)待测尿样本分离后进行尿细胞采样,
待测尿样本进入尿细胞梯度密度离心采样装置,通过尿样本细胞分离装置自动分离后, 转入尿细胞密度梯度离心采样装置,经密度梯度离心采集尿细胞液;
2)尿细胞自动薄层制片,
采集的尿细胞液经稀释后,移至自动制片装置内自动甩片制片;
3)尿细胞片自动微量染色,
制得的尿细胞片移入自动染色装置在玻片染色控制软件控制下进行染片;
4)采集尿细胞染片图像
尿细胞染片置入高分辨率彩色数字自动显微镜平台,经自动显微平台控制软件控制,经 显微镜、视频高清晰度CCD图像采集器传送至LCD彩色显示屏上的图像,
5)尿细胞分类标记和图像拍照,定性、定量分析,
步骤4)的尿细胞染片图像经尿细胞图像实时采集自动分析定量处理软件选定染色细胞 区域后进行尿细胞分类标记和图像拍照,自动进行定性、定量分析;
6)打印尿液检验结果图文报告,资料分类管理。
4.根据权利要求3所述的尿细胞微量染色分析装置,其特征是,所述的步骤1)经密度 梯度离心采集尿细胞液采用1.025~1.095g/ml的Ficoll密度梯度溶液为尿细胞采集液。
5.根据权利要求3所述的尿细胞微量染色分析装置,其特征是,所述的步骤2)的自动 甩片制片中采用1.010~1.050g/ml的Ficoll溶液悬浮提取尿细胞层。
6.根据权利要求3所述的尿细胞微量染色分析装置,其特征是,所述步骤3)的玻片染 色的染液为10~300μl的染色上样量。
7.根据权利要求3所述的尿细胞微量染色分析装置,其特征是步骤3)所述的自动染色 装置中的圆形载物台与载玻片相耦合,圆形载物台同时放置24~364片载玻片,采用旋 转方式进行加样设计,同时控制染色加样的种类为24~64种,加样时间为0.1~1秒, 染色时间为2秒~48小时。
8.根据权利要求3所述的尿细胞微量染色分析装置,其特征是所述步骤5)的定量分析 过程是:尿细胞样本通过滤网分离装置、梯度密度离心提取细胞装置、薄层甩片装置、 染色圆形面积有标尺校正、确定靶细胞后计算机自动完成靶细胞的计数定量,所述的染 色圆形面积直径为0.25~1.0mm。
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