[发明专利]一种变应原保护剂

说明书

技术领域

本发明属于生物药物技术领域，具体涉及包含谷物种子蛋白与海藻糖的变应原保护剂以及该保护剂在常温条件下长时间维持变应原活性稳定中的应用。

背景技术

1.过敏性疾病与变应原药物

随着生态环境的改变，人们接触的致敏物质越来越多，导致过敏性疾病的发病率日趋增加。目前，全球大约有25％的人口受到变态反应性疾病的影响。引起变态反应的物质，称为“变应原”或“过敏原”。变应原种类很多，如异种动物血清、异体组织细胞、微生物与寄生虫、植物花粉、鱼虾蟹等食物，青霉素、磺胺等药物，以及动物毛皮等。

过敏性疾病又称变态反应性疾病，是指机体受变应原物质(过敏原)刺激后，引起的组织损伤或生理功能紊乱的疾病。其发病机理是：变应原进入机体后，诱导B细胞产生IgE抗体。IgE与靶细胞有高度的亲和力，牢固地吸附在肥大细胞、嗜碱粒细胞表面。当相同的变应原再次进入致敏的机体，其与IgE抗体结合，就会引发细胞膜的一系列生物化学反应，启动两个平行发生的过程：脱颗粒与合成新的介质。①肥大细胞与嗜碱粒细胞产生脱颗粒变化，从颗粒中释放出许多活性介质，如组胺、蛋白水解酶、肝素、趋化因子等；②同时细胞膜磷脂降解，释放出花生四烯酸。它以两条途径代谢，分别合成前列腺素、血栓素A2；和白细胞三烯(LTs)、血小板活化因子(PAF)。各种介质随血流散布至全身，作用于皮肤、粘膜、呼吸道等效应器官，引起小血管及毛细血管扩张，毛细血管通透性增加，平滑肌收缩，腺体分泌增加，嗜酸粒细胞增多、浸润，从而引起皮肤粘膜过敏症(荨麻疹、湿疹、皮炎)，呼吸道过敏反应(变应性鼻炎、哮喘、喉头水肿)，眼结膜过敏反应(结膜炎)，全身过敏反应(过敏性休克)。

1998年WHO正式宣布检测变应原并进行特异性免疫治疗是唯一可以影响过敏性疾病自然进程的对因治疗方法，并可防止新的过敏发生。特异性免疫治疗是确定患者的变应原种类后，在非急性期使患者与含该种类变应原的制剂反复接触，剂量由小到大逐渐递增，至最佳维持剂量，提高患者对其耐受性，从而达到控制或减轻过敏症状的一种疗法。所用的变应原制剂，是指那些从含变应原成分的天然材料(包括昆虫、螨类、真菌、动物的皮毛、花粉、食物等)中提取变应原，制成一定浓度的溶液，或者经吸附剂或佐剂将其修饰后制成的用于诊断、预防和治疗过敏病的生物产品。

然而，由于变应原物质本身的组成与结构复杂，易受物理或化学因素的影响而失去活性、降低效价。因此，为了确保用于特异性免疫治疗的变应原药物的疗效，变应原药物一般都不能在常温下长期保存，其运输也必须在低温环境中进行，这给储藏、使用和运输带来了极大的不便。

2.海藻糖在生物领域中的应用

海藻糖(又称蕈糖)是由两个葡萄糖分子通过半缩醛羟基缩合而成，由于不存在游离的醛基，故为一种非还原型双糖。其分子式是C₁₂H₂₂O₁₁·2H₂O，分子量为378.33。海藻糖理化性质非常稳定，无毒无害，不会焦糖化。

海藻糖分布十分广泛，在细菌、酵母、真菌、昆虫和哺乳动物等都有发现，在生物体内它既作为贮存碳源，又是应激代谢的重要产物。海藻糖能帮助酵母细胞抗御营养缺乏、高温、低温、脱水及高渗透压等逆境，在出芽培养基中加入海藻糖能提高酵母细胞出芽率。昆虫体内海藻糖主要存在于血淋巴中，是主要的贮存碳源。饥饿、温度升高或金属等刺激能引起海藻糖含量明显下降，可能此时昆虫能量需求增加，增加了海藻糖的消耗。另外海藻糖还是昆虫细胞保护体系最主要的成员。对昆虫耐冷性的研究发现，海藻糖能够降低昆虫体内形成冰核的过冷点，提高耐寒能力。

温度是影响酶反应效率的重要因素之一，高温能提高酶的催化活力，但易使酶失活。耐热酶的发现为分子生物学带来巨大的进步，如聚合酶链式反应(Polymerasechain reaction，PCR)中运用的热聚合酶(Taq酶)。但目前局限于从一些耐热菌中分离得到耐热酶，而且酶催化反应类型也受到限制。研究发现海藻糖在高温下能保持酶的正常活性，甚至起热激活作用，还能用于提高干燥保存的酶的活性。在反应体系中加入海藻糖，使热敏感的酶在高温下稳定性和活性增加，可当作耐热酶使用。然而，海藻糖并不是对所有酶都有热稳定和热激活的作用，说明只有一些酶蛋白可能具有海藻糖识别和作用的位点。