[发明专利]一种空肠弯曲菌壳聚糖纳米DNA疫苗及其制备方法和应用

权利要求书

1、一种空肠弯曲菌壳聚糖纳米DNA疫苗，是壳聚糖和重组质粒构成的纳米微囊，其特征在于，所说的重组质粒是由空肠弯曲菌鞭毛蛋白基因flaA和真核表达载体pCAGGS组成的pCAGGS-flaA，所述的鞭毛蛋白flaA基因具有SEQ NO.1所示的核苷酸序列。

2、一种权利要求1所述的空肠弯曲菌壳聚糖纳米DNA疫苗的制备方法，包括如下步骤：

1)设计特异性引物：根据GenBank登陆序列gi:30407139设计一对引物：

上游引物：FlaA-F 5′-CATCTAGAAGCATTTAACAAGTTCATGG-3′Xba I

下游引物：FlaA-R 5′-TAGAATTCGTGTTTATCCTAAAACCCAT-3′EcoR I

2)通过PCR技术扩增空肠弯曲菌鞭毛蛋白flaA基因，克隆、回收得到纯化的flaA基因片段；

3)将flaA基因重组到质粒pCAGGS真核表达质粒中，构建成重组质粒pCAGGS-flaA；

4)将构建好的重组质粒pCAGGS-flaA溶于壳聚糖溶液中，制成空肠弯曲菌壳聚糖纳米DNA疫苗。

3、一种权利要求1所述的空肠弯曲菌壳聚糖纳米DNA疫苗在制备用于预防鸡空肠弯曲菌药物中的应用。