[发明专利]一种多食鞘氨醇杆菌及其转化有效霉素的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种多食鞘氨醇杆菌(Sphingobacteriumm ultivorum)及其转化有效霉素的方法，具体涉及从土壤中筛选并分离出一株能够降解有效霉素的鞘氨醇杆菌属(Sphingobacterium)的多食鞘氨醇杆菌，及利用该菌株转化有效霉素为有效霉胺和有效霉烯胺的方法，以及有效霉胺和有效霉烯胺的分离及检测方法。

背景技术

本发明涉及有效霉胺(validamine)及有效霉烯胺(valiednmine)，结构式如下：

有效霉胺(validamine)        有效霉烯胺(valienamine)

有效霉胺，分子式为C₇H₁₅NO₄，重要的基团有：一个伯氨基(-NH₂)，一个羟甲基(-CH₂OH)，三个羟基(-OH)，其盐酸盐(C₇H₁₅NOX·HCI)的[α]_D²³+57.4°(1N-HCl)，熔点为229℃-232℃，[α]_D²¹+60.6°(H₂O)，遇茚三酮显色。

有效霉烯胺，分子式为C₇H₁₃NO₄，重要的基团有：一个伯氨基(-NH₂)，一个碳碳双键(C＝C)，一个羟甲基(-CH₂OH)，三个羟基(-OH)，其盐酸盐(C₇H₁₃NO₄·HCI)的[α]_D²³+68.6°(1N-HCl)，五乙酸盐的熔点为95℃，[α]_D²¹+30.2°(CHCl₃)，遇茚三酮显色。

有效霉胺和有效霉烯胺属假氨基糖，对糖苷酶有竞争性抑制作用，同时也是很多其它糖苷酶抑制剂的核心结构，可用于合成伏格列波糖(voglibose)。

有关有效霉胺和有效霉烯胺的生产方法的研究已经有30多年的历史，日本龟田等人曾经采用过的转化有效霉素为有效霉胺及有效霉烯胺的菌包括：假单胞菌属(Pseudomonas，1个种，Pseudomonas denitrificans，反硝化假单胞菌)、黄杆菌(Flavobacterium，3个种)、嗜纤维菌属(Cytophaga，1个种，3个菌株)、土壤菌属(Agrobacterium，2个种，其中Agrobacterium radiobacter有5个菌株，Agrobacteriumtumefaciens，1个种)、气单胞菌属(Aeromonas，5个种)。内芽孢杆菌属(Paenibacillus)。浙江工业大学筛选出的转化有效霉素为有效胺及有效霉胺的菌株包括：嗜麦芽寡氧单胞菌(Stenotrophomonas maltrophilia)、粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)、荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescence)。并未发现用多食鞘氨醇杆菌转化有效霉素为有效霉胺和有效霉烯胺。

发明内容：

本发明提供一种能够转化有效霉素为有效霉胺和有效霉烯胺的菌株，以及利用该微生物裂解有效霉素生产有效霉胺和有效霉烯胺的方法，和产物有效霉胺和有效霉烯胺的分离及检测方法。

本发明提供的新的微生物菌株属于鞘氨醇杆菌属(Sphingobacterium)的多食鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium multivorum)。

本发明筛选到的菌株基本特征如下：

细胞形态：短杆状。

菌落形态：在LB培养基37℃培养2天，菌落粘液状，乳白色。

生理生化特征：革兰氏阴性，硝酸盐还原反应阳性，亚硝酸盐还原反应阳性，不产生吲哚，精氨酸水解酶阴性，尿酶阳性，β糖苷酶阳性，液化明胶，β半乳糖苷酶阳性，不发酵D-葡萄糖，能利用L-阿拉伯糖、D-甘露糖、D-甘露醇、N-乙酰葡萄糖胺、D-麦芽糖、葡萄糖酸钾、癸酸、柠檬酸钠，不能利用D-葡萄糖、己二酸、羟基丁二酸、苯乙酸。

根据以上细菌学特征及16s rDNA序列对比，鉴定该菌为多食鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium multivorum)。该菌具有转化有效霉素产生有效霉胺和有效霉烯胺的作用。