[发明专利]一种多孔整体材料固定化酶微反应器的制备方法

权利要求书

1.一种多孔整体材料固定化酶微反应器的制备方法，其特征在于：

1)采用四乙氧基硅烷TEOS或四甲氧基硅烷TMOS与氨丙基三乙氧 基硅烷APTES一起作为前体分子，以带有C8-C16烷基链的阳离子表面活 性剂为模板分子，以无水乙醇或甲醇为共溶剂，加水后经由溶胶-凝胶法及 超分子模板法制备得到了一种有机-无机杂化硅胶整体材料载体；所述模板 分子为十六烷基三甲基溴化氨CTAB；

2)对杂化硅胶整体材料载体用戊二醛活化，最后连续泵过含有胰蛋白 酶、苄甲脒以及氰基硼氢化钠NaCNBH₃的磷酸盐缓冲溶液，即可制备得到 一种有机-无机杂化硅胶整体材料固定化酶微反应器。

2.按照权利要求1所述多孔整体材料固定化酶微反应器的制备方法， 其特征在于：所述步骤1)中TEOS或TMOS与APTES的物质的量之比为 3/7--7/3；水与前体分子物质的量之比为＝2.5/1-1.2/1，模板分子的质量mg 与前体分子物质的量mmol之比为6-10；

无水乙醇或甲醇的体积μL与前体分子物质的量mmol之比为 175-250；溶胶-凝胶法聚合反应温度为25℃～80℃，聚合时间为12～24 小时。

3.按照权利要求1所述多孔整体材料固定化酶微反应器的制备方法， 其特征在于：所述步骤2)中载体用戊二醛活化的过程为：将含有体积浓度 5-20％戊二醛的pH＝7.5-8.5磷酸盐缓冲液浸泡整体材料，在室温下反应 4-12小时。

4.按照权利要求1所述多孔整体材料固定化酶微反应器的制备方法， 其特征在于：所述步骤2)中含有1-5mg/mL胰蛋白酶、25-100mM苯甲 脒及2.5-7.5mg/mL的氰基-硼氢化钠NaCNBH₃的pH＝7.5-8.5磷酸盐缓 冲溶液，在1-10℃下反应12-48小时。

5.按照权利要求1所述多孔整体材料固定化酶微反应器的制备方法， 其特征在于：所述制备得到的微反应器用含有体积浓度5-30％ACN的pH ＝7.5-8.5磷酸盐缓冲溶液冲洗酶反应器2-6小时；最后，用0.5-1.25M的 pH＝7.5-8.5Tris-HCl冲洗酶反应器2-6小时。

6.按照权利要求1所述多孔整体材料固定化酶微反应器的制备方法， 其特征在于：所述微反应器不使用时，用含有5-15mM CaCl₂、质量浓度 0.01-0.04％NaN₃的50-100mM pH＝7.5-8.5Tris-HCl保护液保护起来， 贮存于1-10℃下。

7.按照权利要求1所述多孔整体材料固定化酶微反应器的制备方法， 其特征在于：有机-无机杂化硅胶整体材料载体的制备在10～300μm内径 的毛细管中进行。