[发明专利]以基本不依赖pH的方式结合血清蛋白的氨基酸序列、包括其的化合物、及其用途

说明书

发明领域

本发明涉及能够结合血清蛋白诸如血清白蛋白的氨基酸序列；包括或 基本由所述氨基酸序列组成的化合物、蛋白质和多肽；编码所述氨基酸序 列、蛋白质或多肽的核酸；包括所述氨基酸序列、蛋白质和多肽的组合物， 且特别是药物组合物；和所述氨基酸序列、蛋白质和多肽的用途。

具体地，本发明涉及以这样的方式结合血清蛋白的氨基酸序列(和包 括所述氨基酸序列的化合物)，所述方式是当处于生理pH值时，基本不依 赖于pH(如本文中定义)。

按照本发明，已经发现所述氨基酸序列(以及包括至少一种所述氨基 酸序列的化合物，如本文中进一步所述)与不基本独立于pH的方式结合 相同血清蛋白的氨基酸序列相比，在循环中具有有利(即，更长)的半衰 期。

由本文中进一步的描述，本发明的其他方面、实施方案、优势和应用 将变得清晰。

发明背景

能够结合人血清蛋白诸如人血清白蛋白的氨基酸及其在多肽构建体中 增长治疗相关蛋白质和多肽半衰期的用途是本领域中已知的。

例如，WO 91/01743、WO 01/45746和WO 02/076489描述了与血清白 蛋白结合的肽部分，所述血清白蛋白能够与治疗蛋白质和其他治疗化合物 和实体相融合，从而增长其半衰期。然而，这些肽部分是细菌或合成来源 的，其对于用在治疗中是较不优选的。

埃博灵克斯股份有限公司(Ablynx N.V.)的WO 04/041865描述了针 对血清白蛋白(和特别是针对人血清白蛋白)的纳米体(Nanobodies)， 它能够与其他蛋白质(诸如一种或多种针对理想靶标的其他纳米体)相 连，从而增长所述蛋白质的半衰期。

新生Fc受体(FcRn)，也称为“Brambell受体”，与延长白蛋白在循 环中的寿命有关(见Chaudhury等，实验医学杂志(The Journal of Experimental Medicine)，第3卷，第197号，315-322(2003))。FcRn受体 是由可溶性轻链、跨膜区和约50个氨基酸的细胞质尾部组成的完整膜糖 蛋白，所述可溶性轻链由β2-微球蛋白组成，所述β2-微球蛋白通过三个细 胞外结构域与43kDα链非共价结合。所述细胞质尾部包含参与受体内在 化的基于二核苷酸基序的胞吞作用信号。所述α链是蛋白质非经典MHC I 家族的成员。β2m与α链的缔合对FcRn的正确折叠和离开内质网定向到 内体和细胞表面非常关键。

RcRn的整体结构类似于I类分子的整体结构。α-1和α-2区类似由8 个反向平行β链组成的平台，所述反向平行β链形成以2个反平行α-螺旋 为顶端的单β-折叠，所述α-螺旋非常类似于MHC I分子中的肽裂口。由 于α-1螺旋的全面重新定位和α-2螺旋由于存在Pro162而在该螺旋中引入 断裂导致的C-末端部分弯曲，FcRn螺旋彼此相当靠近，从而阻断肽结合。 FcRn的Arg164侧链也阻断肽N-末端与MHC口袋的潜在的相互作用。另 外，α-1和α-2螺旋间的盐桥和疏水性相互作用也对沟关闭作出贡献。

因此，FcRn不参与抗原呈递，且所述肽裂口是空的。

FcRn结合并运输IgG由母体循环穿过胎盘合胞滋养层到达胎儿循环， 并保护成人中IgG免于被降解。除体内稳态外，FcRn控制组织中IgG的 胞转作用。FcRn位于上皮细胞、内皮细胞和肝细胞中。