[发明专利]用于乙醇生产的再工程改造细菌

权利要求书

1.包含整套异源产乙醇基因的重组细菌。

2.包含整套异源产乙醇基因的重组细菌，其中所述整套异源产乙 醇基因整合到核糖体RNA操纵子中。

3.包含整套异源产乙醇基因的重组细菌，其中所述重组细菌不含 有抗生素标记。

4.包含整套异源产乙醇基因的重组细菌，其中一个或多个编码干 扰或以别的方式减少所述整套异源产乙醇基因所产生的乙醇量的多 肽的基因被去除或灭活。

5.包含整套异源产乙醇基因和一个或多个编码促进乙醇的生产或 以别的方式增加所述整套异源产乙醇基因所产生的乙醇量的多肽的 基因的重组细菌。

6.权利要求1-5中任一项的重组细菌，其中所述整套异源产乙醇 基因的表达促使重组细菌生产乙醇作为主要发酵产物。

7.重组细菌，其包含

(a)整合到核糖体RNA操纵子中的整套异源产乙醇基因，其中 所述整套异源产乙醇基因的表达促使重组细菌生产乙醇作为主要发 酵产物；和

(b)一个或多个编码促进乙醇的生产或以别的方式增加所述整 套异源产乙醇基因所产生的乙醇量的多肽的基因；且其中

(i)一个或多个抗生素标记被去除；和

(ii)一个或多个编码干扰或以别的方式减少所述整套异源 产乙醇基因所产生的乙醇量的多肽的基因被失活。

8.权利要求2或权利要求7的重组细菌，其中所述核糖体RNA 操纵子包含选自rrnA、rrlE、rrnC、rrnD、rrnE、rrnG和rrnH的基因。

9.权利要求2或权利要求7的重组细菌，其中所述核糖体RNA 操纵子包含rrlE基因。

10.权利要求1-7中任一项的重组细菌，其中所述整套异源产乙醇 基因包含pdc、adhA和adhB。

11.权利要求1-7中任一项的重组细菌，其中所述整套异源产乙醇 基因衍自运动发酵单胞菌。

12.权利要求3或权利要求7的重组细菌，其中所述抗生素标记选 自安普霉素、卡那霉素、四环素、氨苄青霉素和氯霉素。

13.权利要求4或权利要求7的重组细菌，其中所述一个或多个被 失活的基因编码参与NADH氧化的发酵途径的蛋白质。

14.权利要求4或权利要求7的重组细菌，其中所述一个或多个被 失活的基因编码参与丙酮酸代谢的替代途径的蛋白质。

15.权利要求4或权利要求7的重组细菌，其中所述一个或多个被 失活的基因是细菌的内源基因。

16.权利要求4或权利要求7的重组细菌，其中所述一个或多个被 失活的基因是细菌的异源基因。

17.权利要求13-16中任一项的重组细菌，其中所述一个或多个 被失活的基因选自包含focA-pflB基因区域、ldhA、ackA、adhE、frd操 纵子、casAB和mgsA的基因。

18.权利要求17的重组细菌，其中所述ackA基因、adhE基因、 ldh基因和frd操纵子编码参与丙酮酸代谢的替代途径的蛋白质。

19.权利要求17的重组细菌，其中所述focA-pflB基因区域、ldhA、 ackA、adhE、包含frd操纵子的基因和mgsA是内源基因。

20.权利要求17的重组细菌，其中所述casAB基因是异源基因。

21.权利要求17的重组细菌，其中ldhA基因被缺失。

22.权利要求21的重组细菌，其中所述ldhA基因是内源基因。

23.权利要求1-5中的重组细菌，所述重组细菌还包含focA-pflB 基因区域。