[发明专利]能够抑制UBC13-UEV相互作用的化合物、药物组合物及治疗用途

说明书

发明领域

本发明属于药物化学领域，并且更具体地涉及对UBC13-UEV相互 作用具有抑制活性的治疗化合物的开发，并涉及用于抗肿瘤治疗或用于 治疗和/或预防与涉及UBC13酶的代谢途径、涉及转录因子NF-κB的代 谢途径或涉及PCNA或RAD6的途径相关的疾病的药物组合物的生产或 应用。

背景技术

蛋白的翻译后修饰被称为泛素化，其包括在底物蛋白的赖氨酸和泛 素肽的羧基端甘氨酸之间形成异肽键[1]。泛素(Ub)分子是具有76个氨基 酸的多肽，富含于胞浆和细胞核中。Ub分子与E1酶(Ub-激活酶)形成硫 酯键，所述E1酶在需要ATP的反应中激活Ub分子，使后者处于有利于 与被称为E2或泛素缀合酶的第二类酶的催化半胱氨酸形成硫酯键的状 态。人类只有一种E1酶，但是可能有接近30种E2型酶。E2酶能够向 底物蛋白转移Ub分子，在Ub的羧基端甘氨酸和底物蛋白的赖氨酸之间 形成异肽键。底物蛋白通过共价加成泛素单元而进行的修饰被称为单泛 素化。相同的E2酶能够催化Ub分子向预先与底物蛋白连接的另一Ub 分子的转移，在泛素之间形成异肽键。该反应能够重复多次，从而形成 多聚泛素链，该过程被称为多泛素化。泛素分子有七个赖氨酸，其中任 何一个都能够用于在泛素之间形成异肽键。测定不同类型的多聚泛素链 丰度的试验表明，在多聚泛素链的形成中使用最多的泛素分子赖氨酸是 位于泛素的29、48和63位的那些[2，3]。通过与48位(K48)赖氨酸的异 肽键在底物蛋白上形成具有四个或多个Ub单元的多聚泛素链是被蛋白 酶体调节颗粒的亚单位识别的信号[4]，从而被如此修饰的蛋白被蛋白酶 体处理和降解。相反，通过经由泛素的63位(K63)赖氨酸的异肽键而形 成的多聚泛素链似乎不被蛋白酶体识别[5]，因此这种多泛素化不是被修 饰蛋白的蛋白酶体处理和降解的信号。人们对其它形式的多泛素化的功 能或所述修饰对底物蛋白的意义了解不多。通过泛素的赖氨酸48(K48) 的多泛素化被称为“典型的”多泛素化，而使用任一其它赖氨酸的多泛 素化被称为“非典型的”或“变异的”多泛素化[6]。许多E2能够催化 Ub的转移以形成K48或K29型多聚泛素链，而K63型多聚泛素链的形 成似乎特异性地需要异二聚体UBC13-UEV1或UBC13-UEV2[6]。通过 对这种键(K48或K63)有特异性的水解酶(异肽酶)的活性而阻碍多聚泛素 链的产生。

需要异二聚体UBC13-UEV1及其介导K63型多泛素化的活性的 两种生物化学过程是PCNA(增殖细胞核抗原)介导的DNA修复[7]和 诸如TNFα或IL-1的细胞因子引发的信号传输[8]。在酿酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae)中，异二聚体Ubc13p-Mms2p(Mms2p是 UEV1和UEV2的直系同源酿酒酵母蛋白)对于通过变异的(K63型)多 泛素化的PCNA修饰十分重要[7-11]，其参与被称为“无错”的RAD6 (泛素缀合酶)依赖的跨损伤DNA修复路径[12-16]。蛋白PCNA通过在 S期开始时的SUMO化(SUMO分子的共价键接)而被修饰，这为其提 供了稳定性，允许其在细胞周期的该期间内在DNA复制中的活性[7， 9]。S期之外，PCNA通过与泛素连接酶Rad18p相关的Rad6p缀合酶 而被典型的多泛素化修饰。然而，作为对基因毒性损伤的响应，发生 异二聚体Ubc13p-Mms2p的入核，这与泛素连接酶Rad5p相关，催化 PCNA的K63型多泛素化，与通过Rad6p介导的典型的多泛素化修饰 竞争，从而防止PCNA的降解，这因此能够用于DNA中切口的跨损 伤修复[7-11，17]。在哺乳动物中，尚未明确证实PCNA被UBC13-UEV1 (或UBC13-UEV2)介导的变异多泛素化修饰，并且因此，与酿酒酵母 不同，这种底物修饰在PCNA依赖的DNA修复中的作用是不清楚的。