[发明专利]一种无损转移蛋白质晶体的方法和装置无效

专利信息
申请号: 200710304101.8 申请日: 2007-12-25
公开(公告)号: CN101201300A 公开(公告)日: 2008-06-18
发明(设计)人: 戴国亮;刘兴宇 申请(专利权)人: 中国科学院力学研究所
主分类号: G01N1/28 分类号: G01N1/28;G01N33/48
代理公司: 北京中创阳光知识产权代理有限责任公司 代理人: 尹振启
地址: 100080北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 无损 转移 蛋白质 晶体 方法 装置
【说明书】:

技术领域

发明涉及一种转移晶体的方法和装置,尤其是一种无损转移蛋白质晶体的方法和装置。

背景技术

蛋白质是一切生命的物质基础,其重要的生理功能由其三维结构决定。但了解蛋白质的三维结构的前提是获得高质量的蛋白质晶体。近来,采用各种观测设备观察蛋白质晶体生长过程的研究已经普遍开展,此类实验均需要对蛋白质晶体进行观察,并且从蛋白质晶体生长池中转移出适宜于实验观察的蛋白质晶体是此类实验所必需的实验步骤之一。

当前,传统的转移蛋白质晶体的方法存在三个问题:

1)被转移的蛋白质晶体极易发生破裂或表面形貌被改变。蛋白质晶体一般晶体体积小、易碎,因此在转移蛋白质晶体的过程中被转移的晶体极易发生破裂或表面形貌被改变。目前普遍采用绳圈操作方法,即通过绳圈套住晶体后转移晶体的方法。但由于在操作绳圈套住晶体的过程中,人工施加的作用力难以控制,很容易产生绳圈割碎蛋白质晶体的现象。

2)一旦晶体发生破裂或表面形貌发生改变,由于蛋白质晶体内部应力发生了变化,使得被转移的蛋白质晶体内部存在大量新出现的缺陷或裂纹,晶格中的位错数目增加。那么,在随后观察晶体生长过程时,蛋白质晶体生长过程中新生长出来的部分也会随之有所变化,使得新生长部分表面的缺陷较多,质量不高。

3)操作过程中很容易在新生长溶液中引入一部分原生长溶液。这最终导致蛋白质晶体的生长受到较大影响。这其中的原因是,一方面,原生长溶液的引入,改变了新生长溶液的成分,从而改变了生长条件;另一方面,蛋白质晶体表面的吸附物以及原生长溶液中的数目众多的蛋白质晶核也会附带被转移至目的器皿中。这些蛋白质晶核的尺寸极小(小于0.1μm),在普通的光学显微镜下无法看清,也无法通过过滤等手段除去。当蛋白质晶体在目的器皿中再次生长时,这些蛋白质晶核也会逐渐生长,并最终成为肉眼可见的微小晶体。这些微小晶体的存在严重干扰了对目标蛋白质晶体的观察,同时在一定程度上也干扰了目标蛋白质晶体的生长过程。

因此,在克服上述问题下能有效的转移蛋白质晶体,成为获得高质量蛋白质晶体的实验中存在的重要问题

发明内容

针对现有技术存在的问题,本发明的首要目的是提供一种无损转移蛋白质晶体的方法,利用该方法能够无损转移出所需要的蛋白质晶体,又能够阻止原蛋白质生长溶液中的蛋白质晶核进入目的器皿中。本发明的进一步目的是提供一种实施上述方法的装置。

为实现上述目的,本发明一种无损转移蛋白质晶体的方法,具体为:

1)配制蛋白质溶液。依据蛋白质的溶解度、室温值,配制出蛋白质溶液的浓度为稍大于操作温度下蛋白质的溶解度,将所制得的蛋白质溶液加入到一多孔表面皿的孔槽中;

2)在已生长出蛋白质晶体的生长池中加入步骤1中制备的蛋白质溶液,至稍有溢出,然后缓慢倒置该生长池,以便蛋白质晶体逐渐下落至生长池口处的溶液和空气界面处;

3)将倒置的生长池移到多孔表面皿中的第一个孔槽中溶液上方,缓慢下降生长池,使生长池口的溶液刚好接触到孔槽中溶液,从而将生长池中的蛋白质晶体转移到多孔表面皿的第一个孔槽中;

4)将多孔表面皿转移到普通光学显微镜下观察,选中合适的蛋白质晶体,用带有吸头的微量可调移液器吸取此晶体,将吸取晶体后的微量可调移液器移至多孔表面皿中第二个孔槽中溶液的上方,逐渐竖直、缓慢下降微量可调移液器,并推动微量可调移液器进行排液,使一滴蛋白质溶液由吸头中排出并悬挂在吸头上,静置,待蛋白质晶体下落至吸头处的溶液和空气界面处时,将该悬滴溶液与多孔表面皿中的第二个孔槽中的溶液刚好接触,从而将蛋白质晶体转移到多孔表面皿的第二个孔槽中;

5)按照步骤4的方法将蛋白质晶体由多孔表面皿第二个孔槽中转移至第三个孔槽的溶液中,同理,还可按照步骤4的方法将蛋白质晶体在多孔表面皿的其它孔槽上进行依次转移;

6)用微量可调移液器吸取该蛋白质晶体,将晶体转移到目的器皿中,以便进行后续实验。

一种实施上述方法的无损转移蛋白质晶体的装置,该装置包括蛋白质生长池、多孔表面皿、微量可调移液器,其中多孔表面皿上设置有多个孔槽,蛋白质生长池用于培养蛋白质晶体,微量可调移液器用于将蛋白质晶体转移到所述多孔表面皿的孔槽中,并将蛋白质晶体在所述多个孔槽间依次转移。

进一步,所述蛋白质生长池为圆形玻璃管,其内壁上设置有一层聚四氟乙烯薄膜,并且该生长池上还设置有一上盖。

进一步,所述多孔表面皿为长方体结构,其用透明的玻璃材质制成,并且该多孔表面皿的上表面上设置有多个孔槽,该孔槽中可加入蛋白质溶液。

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