[发明专利]含有抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体的细胞生长抑制剂

说明书

本申请为国际申请PCT/JP2002/006237于2003年12月22日进入中国国家阶段、申请号为02812570.3、发明名称为“含有抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体的细胞生长抑制剂”的分案申请。

发明领域

本发明涉及含有抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体作为活性成分的细胞生长抑制剂。

发明背景

磷脂酰肌醇蛋白聚糖家族一直被报道为细胞表面上存在的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的新家族。迄今，5种磷脂酰肌醇蛋白聚糖(磷脂酰肌醇蛋白聚糖1、磷脂酰肌醇蛋白聚糖2、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3、磷脂酰肌醇蛋白聚糖4和磷脂酰肌醇蛋白聚糖5)已被报道成磷脂酰肌醇蛋白聚糖家族的成员。这些家族成员具有大小一致的核心蛋白(约60kDa)，享有特异和完全保守的半胱氨酸序列，并且通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚结合到细胞膜上。

通过对在中枢神经系统发育中具有异常细胞分裂模式的果蝇(Drosophila melanogaster)变体的基因进行筛选已鉴定了Dally(分裂异常延迟的)基因。已知Dally的cDNA代表一可读框(ORF)，所述ORF编码其序列显示与含有所有磷脂酰肌醇蛋白聚糖特征的脊椎动物的跨膜蛋白聚糖(GRIP)同源(24-26％的同源性)的产物。并且还已提示dally基因在调节dpp(decapentaplegia)受体机制中发挥作用。这暗示哺乳动物的磷脂酰肌醇蛋白聚糖可调节TGF和BMP之间的信号转导。具体而言，已提示磷脂酰肌醇蛋白聚糖可起到一些肝素结合生长因子(例如EGF、PDGF、BMP2和FGF)的共同受体的作用。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3已被分离为大鼠肠中发育调节下的转录物(Filmus，J.，Church，J.G.和Buick，R.n.(1988)Mol.Cell Biol.8，4243-4249)，然后鉴定成一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖家族的GPI-连接的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖OCT-5，其核心蛋白的分子量为69kDa(Filmus，J.，Shi，W.，Wong，Z.-M.和Wong，M.J.(1995)Biochem.J.311，561-565)。同样在人中，编码磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的基因已从人胃癌细胞系中被分离为MXR-7(Hermann Lage等，Gene 188(1997)151-156)。已有报道，磷脂酰肌醇蛋白聚糖3与胰岛素样生长因子-2形成蛋白-蛋白复合体，以便调节生长因子的作用(Pilia，G.等，(1996)Nat.Genet.12，241-247)。此报道提出磷脂酰肌醇蛋白聚糖3不总是与含有硫酸乙酰肝素链的生长因子相互作用。

已有报道建议磷脂酰肌醇蛋白聚糖3可用作肝癌标记(Hey-ChiHsu等，CANCER RESERCH 57，5179-5184(1997))。然而，没有发现说明磷脂酰肌醇蛋白聚糖3和癌细胞增殖之间的明确关系。

此外，也有提示磷脂酰肌醇蛋白聚糖可起到内皮抑素(endostatin)受体的作用，所述内皮抑素可用作血管形成抑制剂(Molecular Cell(2001)，7，811-822)。但是，这种功能与细胞增殖之间的关系仍然未加以阐述。

如上所述，已说明了磷脂酰肌醇蛋白聚糖3参与细胞增殖。然而，细胞增殖机制等是未知的，以及磷脂酰肌醇蛋白聚糖3对细胞增殖的调节的应用从未尝试过。

发明概述

本发明的目的是提供含有抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体作为活性成分的细胞生长抑制剂。

深入研究的结果发现，抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体通过ADCC(抗体依赖的细胞介导的细胞毒性)活性和CDC(补体依赖的细胞毒性)活性而施加细胞增殖抑制活性，由此完成了本发明。此外，还预测抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体也通过抑制生长因子的作用而施加细胞增殖抑制活性。而且，抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体也通过与诸如放射性同位素、化疗剂或细菌衍生的毒素等的细胞毒性物质结合而施加细胞增殖抑制活性。

本发明的主题如下：

(1)一种细胞生长抑制剂，其含有抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体作为活性成分；

(2)(1)所述的细胞生长抑制剂，其中抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3抗体具有细胞毒性活性；

(3)(2)所述的细胞生长抑制剂，其中细胞毒性活性为抗体依赖的细胞介导的细胞毒性(ADCC)活性或补体依赖的细胞毒性(CDC)活性；

(4)(1)-(3)中任一项所述的细胞生长抑制剂，其中细胞为癌细胞；

(5)(4)所述的细胞生长抑制剂，其中细胞选自肝癌细胞、肺癌细胞、结肠癌细胞、乳腺癌细胞、前列腺癌细胞、白血病细胞、淋巴瘤细胞和胰腺癌细胞；