[发明专利]从未经发芽的豇豆干种子中直接快速提取DNA的方法

权利要求书

1.一种从未经发芽的豇豆干种子中直接快速提取DNA的方法，其特征在于包括如下步骤：

1)取1.5mL离心管装入1mL CTAB提取液，于60～65℃水浴下预热；

2)将一颗种子置于研钵中，冰浴中充分研磨，将研磨后的粉末转入预热的离心管中，剧烈振荡，置于60～65℃水浴中加热10～30min后于15～20℃，10000转/min离心10～20min；

3)取上清液转入另一1.5mL离心管，加入等体积的混合液，混合液中，苯酚、氯仿、异戊醇的体积比为25∶24∶1，反复上下颠倒离心管，充分混匀后于15～20℃，10000转/min离心10～20min，重复一次；

4)取上清液，加入2倍体积的无水乙醇，以及1/10体积的3M醋酸钠溶液，轻轻上下颠倒混匀，出现絮状DNA沉淀；

5)4℃，5000转/min离心1～2min，去上清液，加入200～500μl无水乙醇，上下颠倒离心管，使DNA沉淀充分被洗涤；

6)去掉上清液，室温风干至无酒精味；

7)加入50～100μl TE将干燥的DNA沉淀室温溶解。

2.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述的提取液的组成为重量体积比2％的CTAB，1.4M NaCl，0.02M EDTA，0.1M Tris-HCl，pH8.0。

3.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述的TE的组成为10mMTris-HCl、1mM EDTA，pH8.0。