[发明专利]鹿茸促生长释放因子(DEER GHRF)提取及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于鹿茸提取物的医用或食用制品领域。更具体地来说，本发明涉及由鹿茸提取生长激素释放激素(GHRH)的方法以及富含生长激素释放激素的鹿茸提取物。另外，本发明还涉及该鹿茸提取物在药品、食品、化妆品和饲料等方面的应用。

背景技术

鹿茸(鹿尚未骨化的幼角)和鹿角作为传统的中药材，具有强筋健骨、补肾壮阳、疏通血脉等功效，自古以来就被广泛应用于配制成为各种滋补药品、食品、保健品和化妆品。通过现代药物化学研究分析，鹿茸中含有许多种生理活性成分，包括磷脂、生物胺类化合物、前列腺素、维生素、氨基酸、无机盐、不保护脂肪酸、皮质醇等。随着现代生物技术高速发展，人们发现鹿茸中除了含有上述各种生理活性成分之外，其中还含有胰岛素样生长因子(IGF-1)、胰岛素、人生长激素(HGH)、表皮生长因子(EGF)、神经生长因子(NGF)、生长激素释放激素(GHRH)、成纤维生长因子(FGF)等大分子活性蛋白质。以上各种活性成分，尤其是各种活性蛋白质，相互协同作用，发挥功效。其中，生长激素释放激素具有突出的药理作用。

生长激素释放激素(GHRH)又称为促生长释放因子(或生长激素释放因子，GHRF)或生长激素调节激素，其能够正向调控生长激素(GH)的作用，促进垂体合成、分泌GH，从而通过GH提高体内IGF-1水平来促进细胞分裂。因此，GHRH已经被应用于治疗由于生长不充分而引起的疾病，如肌肉萎缩、慢性肾功能不全、特纳综合症等(参见中国专利CN1635898A、CN1432577A等)。另外，由于GHRH能够促进动物生长，因而已经广泛用作食品或饲料添加剂。

然而，在传统的鹿茸加工过程中，鹿茸直接粉碎后服用，颗粒较大，造成吸收效率低下；有时，鹿茸的加工需要经过加热煎煮、烘干等步骤，高温会使其中的GHRH等蛋白质变性，从而降低乃至丧失它们的功效。另一种传统的加工方式是将鹿茸浸泡在高浓度酒精含量的酒中，制成药酒服用。但是由于酒中含有高浓度的作为有机溶剂的酒精，会使GHRH等蛋白质变性，而且从大颗粒鹿茸中也不利于溶解出GHRH等蛋白质，因而会导致鹿茸中的GHRH利用效率低下，造成资源浪费。另外，高浓度酒精含量的药酒也限制了每次的服用量。目前，我们还没有发现有从鹿茸中提取生长激素释放激素的报道。

针对现有技术中存在的缺陷，为了提高鹿茸材料的使用效率，经过长期艰苦的研究摸索，本发明人获得了一种提取鹿茸生长激素释放激素的方法以及富含生长激素释放激素的鹿茸提取物。这些产品的制备采用天然中药原料，没有引入有害化学试剂，安全性佳，易于为消费者所接受。

发明内容

本发明的发明目的在于提供提取鹿茸生长激素释放激素(DEER GHRF)的方法以及富含生长激素释放激素的鹿茸提取物，并提供了该鹿茸提取物在药品、食品、化妆品和饲料等方面的应用。

具体而言，在第一个方面，本发明提供了一种提取鹿茸生长激素释放激素的方法，其依次包括以下步骤：

(1)粉碎鹿茸并浸提出鹿茸浸提液；

(2)超滤鹿茸浸提液并收集分子量介于1k～10kDa之间的鹿茸提取物；并

(3)将上述鹿茸提取物进行分子排阻高效液相层析，收集含鹿茸生长激素释放激素的洗脱峰。在本文中，术语“鹿茸生长激素释放激素”指的是来自鹿茸的具有生长激素释放激素活性的蛋白质。通过本领域普通技术人员熟悉的实验手段(如，本文实施例中提到的实验方法)就可以判断提取自鹿茸的蛋白质是否具有生长激素释放激素活性，并检测出该蛋白质的纯度，如分析层析洗脱的图谱。优选本发明的鹿茸生长激素释放激素纯度大于90％，更优选大于95％。

本文中，鹿茸浸提液指的是用水或缓冲液对鹿茸进行浸渍而得的提取液，其中含有鹿茸中的水溶性成分，包括生长激素释放激素。本发明优选选用新鲜鹿茸或冷藏的新鲜鹿茸作为原材料，这样有利于最大限度地保存GHRH的含量和活性。本文中所用的术语“新鲜”指的是采集鹿茸后6小时内就开始进行加工制备本发明的纳米化制品或进行冷藏了，优选加工或冷藏不迟于采集后的3小时，更优选不迟于1小时，最优选不迟于20分钟。本文中所用的术语“冷藏”指的是将鹿茸保存于0℃以下的环境中，优选保存于-20℃的环境中。优选浸提鹿茸前先将鹿茸粉碎(如，切片、研磨、匀浆和/或超声波破碎)，这样有利于提高浸提出有效成份的效率。通过离心和/或过滤等方式，可以收集鹿茸浸提液，去除不溶物质。