[发明专利]藏茵陈有效成分的提取方法

说明书

                        背景技术

藏茵陈为藏医用于治疗各种肝炎、胆囊炎、肝损伤、肝纤维化、脂肪肝等疾病的习用药材，属龙胆科獐牙菜属(Swertia)植物，具有清热解毒，舒肝利胆、退黄的作用。研究资料表明，藏茵陈含有多种化学成分，主要有效成分为齐墩果酸，以及以獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、龙胆苦苷为主的苦苷类、以当药黄素为主的黄酮类、以芒果苷为主的黄酮苷类(杨慧玲、刘健全，9种“藏茵陈”原植物中的7种有效化学成分研究，中草药，2005，36(8)，1233-1237)，上述成分具有治疗肝中毒、清热、消炎、保肝、降低转氨酶、抗氧化、抗菌等多种活性，是藏茵陈治疗肝胆系统疾病的主要药效成分。藏茵陈单方或复方制剂的口服固体制剂、注射剂有的已经形成工业化产品，其疗效已经被大量临床证实。但不论针剂和片剂，均是对藏茵陈进行初步提取、分离，有效成分含量低。有的针剂采用水提醇沉或醇提水沉，除蛋白、纤维困难，久置发生沉淀(赵新先，中药注射剂，1998，146-148)；有的针剂水醇提取后离心超滤，可以除掉颗粒杂质及大分子物质，但不能去掉小分子杂质，而中药注射液要求有效部位需要达到70％以上，其应用受到限制；片剂则是用乙醇提取后不经分离，直接浓缩压片，有效成分含量更低，每次需要服用的剂量较大。

                        发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种提取工艺简单、有效成分含量高的藏茵陈有效成分的提取方法。

本发明解决上述技术问题采用的技术方案是：

藏茵陈有效成分的提取方法，其特征在于该提取方法如下：

第一步：提取：取藏茵陈切成段、或粉碎成粉末、或用全草，加水或乙醇提取，合并提取液；最佳提取溶剂为50％-80％乙醇；提取过程中溶剂用量为生药量的3-15倍，最佳用量为生药量的5-10倍；提取过程可采用加热煎煮或回流提取，提取时间为30分钟至5小时/次，提取次数为2-5次，最佳提取时间为1-2小时，提取次数为2-3次；也可采用超声提取，可加水或乙醇提取，最佳提取溶剂为50％-80％乙醇；溶剂用量为生药量的3-15倍，提取次数为1-5次，提取时间为5分钟至4小时/次，最佳溶剂用量为生药量的5-10倍，提取次数为2-3次，提取时间为15分钟至2小时/次，超声频率为20-200kHz；

第二步：除杂：提取液经放置、过滤或离心后取滤液或上清液备用；提取液可经放置12小时以上取上清液、或不经放置直接取提取液经加有滤布、滤纸或绸布、电力纺的板框压滤，也可经1000-20000rpm/min离心，离心过程可加纸浆、硅藻土作为离心滤层，或采用高速离心机直接离心；

第三步：浓缩：提取液浓缩0.5g-3g/ml；浓缩可采用减压浓缩罐、三效或双效浓缩器、升膜减压浓缩，水提取液可直接浓缩到0.5g-3g/ml，乙醇提取液需要浓缩到无醇味再加水至0.5g-3g/ml，最佳浓度为1-2g/ml；

第四步：初步分离：冷藏或室温放置或离心、过滤，取清液备用；浓缩液放置12小时以上使其自然沉淀澄清，取上清液；可加澄清剂如果汁101澄清剂、ZTC澄清剂、甲壳素、明胶、硅藻土的其中一种，用量为0.5-10％，放置后经1000-20000rpm/min离心或过滤；

第五步：吸附分离：取上清液，加到已经处理好的大孔吸附树脂柱上，用水及30％-80％乙醇洗脱，分别收集洗脱液，大孔吸附树脂柱可采用D101、D201、AB8、LK002的其中一种或几种合用，上样，经水充分洗涤后，用30％-80％乙醇洗脱；

第六步：浓缩、干燥、粉碎：洗脱液经减压浓缩或常压浓缩成清膏，密度50℃热测1.20-1.36，减压干燥或微波减压干燥，粉碎；或浓缩至密度为50℃热测1.05-1.20的浓缩液，喷雾干燥；本提取物可作为最终产品，含黄酮、苦苷类物质30％-50％；

第七步：进一步精制，得含黄酮、苦苷类物质60％-95％的提取物；提取物粉末按重量/体积比的3-10倍加热水溶解，趁热过滤，滤液浓缩至浓浆状，放至室温，加体积比2-5倍的丙酮沉淀，过滤，沉淀用丙酮洗涤，抽干，常压干燥或减压干燥，粉碎；

也可按以下方法精制：提取物粉末按重量/体积比的3-10倍加热水溶解，趁热过滤，滤液浓缩至浓浆状，放至室温，加体积2-5倍的乙酸乙酯萃取4-5次，合并乙酸乙酯层，蒸去乙酸乙酯，常压干燥或减压干燥，粉碎；