[发明专利]快速检测日本血吸虫的荧光定量PCR试剂盒有效
申请号: | 200710053121.2 | 申请日: | 2007-09-04 |
公开(公告)号: | CN101131347A | 公开(公告)日: | 2008-02-27 |
发明(设计)人: | 王业富;周立;赵友云 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | G01N21/00 | 分类号: | G01N21/00;C12Q1/68 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 | 代理人: | 黄瑞棠 |
地址: | 43007*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 快速 检测 日本 血吸虫 荧光 定量 pcr 试剂盒 | ||
1.一种快速检测日本血吸虫的荧光定量PCR试剂盒,其特征在于:
由DNA提取液、荧光定量PCR反应液、标准阳性模板pU-SJ、阴性质控标准品组成;荧光定量PCR反应液日本血吸虫对和荧光探针;
正向引物为5'-CACAG ACACG GCTGA AAGGT T-3',
反向引物为5'-TGCTT GTTCA CGGTC TTGGT TA-3',
荧光探针序列为5'-CACTA CGCCG AGCTG ACCAC TGCC-3';
荧光探针5'端标记报告荧光基团FAM,3'端标记不发光的淬灭基团标记Eclipse,标准阳性模板pU-SJ含有日本血吸虫高度保守基团18S-rDNA的81个碱基对的核苷酸片段构成的pUCm-T载体,该载体在大肠杆菌DH5α中增殖;
所述的PCR即聚合酶链式反应,所述的SJ即日本血吸虫。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征是:
荧光定量PCR反应液是由PCR10×buffer,10μmol/L的正向引物和反向引物,10μmol/L SJ荧光探针,25mmol/L MgCl2,10mmol/L dNTPs和无菌双蒸水组成。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征是SJ标准阳性模板pU-SJ所包含的18SrDNA基因的核苷酸序列为:
CACAGACACGGCTGAAAGGTTGCACAACCACTACGCCGAGCTGACCACTGCCCTGATCGTAACCAAGACCGTGAACAAGCA。
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