[发明专利]一种蝴蝶兰查尔酮合酶基因,其编码序列和应用

权利要求书

1.一种分离出的查尔酮合酶基因，其特征在于为一种特定序列的DNA分子，长1855bp，具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

2.一种如权利要求1所述的查尔酮合酶基因的蛋白质分子，其特征在于具有SEQID NO.2所示的氨基酸编码序列。

3.用于调取获得蝴蝶兰样品中查尔酮合酶基因的核苷酸引物序列，其特征在于为如权利要求1所述查尔酮合酶基因的家族保守区域设计的兼并引物，及用于进一步扩增phchs5基因上下游序列的反式PCR引物，这些引物序列如SEQ ID NO.3所示。

4.一种将如权利要求1所述的蝴蝶兰查尔酮合酶基因的核苷酸编码序列SEQ IDNO.1转入矮牵牛，并改变其花色素苷含量的方法，具体步骤为；

(1)将编码具有蝴蝶兰查尔酮合酶基因的开放读框可操作的连接于植物表达载体；

(2)将步骤(1)中的表达载体转入农杆菌，将含有表达载体的农杆菌与矮牵牛叶片共培养；

(3)通过筛选，PCR鉴定，获得再生转基因植株，转基因植物的花色发生改变，花色素苷含量变化。

5.一种用于检测样品中蝴蝶兰查尔酮合酶基因拷贝数的方法，其特征在于使用权利要求1所述查尔酮合酶基因核苷酸序列SEQ ID NO.1对蝴蝶兰基因组DNA样品进行southern杂交，然后检测目的片段的有无；样品为蝴蝶兰的基因组DNA，经限制性内切酶酶切后的核苷酸片段。

6.一种用于检测样品中是否存在如权利要求1所述的蝴蝶兰查尔酮合酶基因的核苷酸序列SEQ ID NO.1的方法，其特征在于使用SEQ ID NO.4的核苷酸序列对转基因样品进行PCR扩增，然后检测目的片段有无，样品为转基因矮牵牛基因组DNA。