[发明专利]贝类外套膜胶原蛋白及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物资源与环境技术领域，具体涉及一种贝类外套膜胶原蛋白产品及其制备方法。

背景技术

胶原蛋白是动物体尤其是哺乳动物体内含量最多的蛋白质，广泛存在于动物的皮、骨、软骨、牙齿、肌腱、韧带和血管中，占人体蛋白质总量的30％，是结缔组织极重要的蛋白结构，起着支撑器官、保护肌体的功能。目前，胶原蛋白已被广泛应用于美容化妆品、人工皮肤、组织工程等生物医用材料和食品保健等方面。工业生产中的胶原蛋白主要来源于牛皮、猪皮和骨骼中。由于疯牛病和口蹄疫等传染病的发生，利用牛皮、猪皮提取胶原蛋白已使人们对牲畜胶原制品安全性产生疑虑，为了解决这一问题，寻找新的提取胶原蛋白的原料愈来愈迫切。水产动物废弃物中含有丰富的胶原蛋白，具有很大开发利用潜力。

目前国内对胶原蛋白的研究主要集中在鱼鳞、鱼皮、海蜇、海洋空肠生物等，已公开的专利主要有“未变性鱼鳞胶原的制备方法”(公开号[CN1948411A])、“从鱼鳞中提取胶原蛋白的脱脂脱灰工艺”(公开号[CN1800216A])、“鱼鳞胶原蛋白的生产方法”(公开号[CN1628540A])、“一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法”(公开号[CN1888075A])、“鱼鳞胶原蛋白及其制造方法”(公开号[CN1986828A])、“一种鱼鳞胶原蛋白生产工艺”(公开号[CN1775950A])、“II型胶原蛋白复合物制备工艺”(公开号[CN1721546A])、“海蜇胶原蛋白及其制备方法”(公开号[CN1803836A])等，但还未见贝类动物胶原蛋白产品及其制备方法的专利及研究报道。

据调查，目前全国育珠面积已超过85万亩，年接种珠蚌约5亿～8亿只。随着我国淡水珍珠产量的逐年增加，采珠后蚌废弃物的产量也在增加，每年采珠后我国约有3万吨的蚌废弃物产生，其中软体部分的废弃物约达到1.2万吨，废弃物中只有不到0.1％的部分得到了开发利用，除加工成低附加值的饲料外，往往都被丢弃，没有得到充分利用，这样做不但对环境遭成了重大污染，同时也是对资源的一种浪费，更加剧了现今珍珠产业的负担。经我们研究，蚌外套膜中蛋白质含量约占总干物质的50％，其中近一半为胶原蛋白，因此回收蚌外套膜中的胶原蛋白，不但可以把采珠后的废弃物充分利用，而且还可以作为一种新的胶原蛋白原料，同时还保护了环境，提高珍珠产业的附加值。

发明内容

本发明的目的是提供一种贝类外套膜胶原蛋白产品及其制备方法。

为达到上述目的，一方面本发明公开了一种贝类动物胶原蛋白，所述胶原蛋白从贝类的外套膜中提取，呈白色、絮状、无腥味，其α肽链的分子量为430KD，变性温度31℃，特征粘度11.2dL/g，每1000个氨基酸残基中含甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸分别为265、88、56。

另一方面，上述对胶原蛋白进行提取回收的方法具体实施如下：

a)清洗贝类外套膜；

b)均质：加入1～20倍体积的含0.1～5％磷酸盐的洗出液，捣碎均质后，再搅拌处理0.5h～10h；

c)去除杂蛋白：离心，5000～10000g，10～30min，去除上清液；

d)重复进行步骤b和c操作1～3次；

e)抽提胶原蛋白：步骤d)所得沉淀加入1～20倍体积0.5M弱酸，5～15℃下提取2～72h；

f)盐析：离心取上清液，加入1～5M中性盐使胶原蛋白在该体系中沉淀出来；

g)透析、干燥。

其工艺流程如下：

所述贝类可为马氏珍珠贝、白碟贝黑碟贝、企鹅贝、三角帆蚌、褶纹冠蚌池碟蚌或背角无齿蚌中之一或组合。

所述贝类的外套膜，可为新鲜原料或经过低温保藏处理的冷冻原料及其捣碎原料。

所述所用水可以为蒸馏水、纯净水，最好为去离子水。

上述0.1～5％(w/v)磷酸盐溶液洗出液优选磷酸氢二钠。

所述的抽出液为0.1-0.5M弱酸可以为醋酸、柠檬酸和乳酸等，以醋酸为最佳，可添加或不添加各种来源的酸性蛋白酶。

所述的中性盐可采用KCl、NaCl等。

所述干燥方法最好用真空干燥以及冷冻干燥，以避免蛋白质变性，影响其功能特性。