[发明专利]甜菜碱在制备预防和治疗饮食性肥胖药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属中药技术领域，具体涉及甜菜碱的药物新用途，更具体地，本发明涉及甜菜碱在预防和治疗饮食性肥胖中的应用。

背景技术

甜菜碱是一种天然化合物，无毒、无害，且性质稳定，广泛分布于动植物中。60年代，有研究发现甜菜碱对大鼠机体甲基代谢有显著的调控作用，于是将它作为甲基供体治疗人先天性胱氨酸尿症的特定药物。近年来，随着对甜菜碱在动物营养上研究的不断深入，证实了甜菜碱是动物机体内重要的甲基供体，参与氨基酸和脂肪代谢，具有促进生长、改善胴体组成等功效。

研究表明，甜菜碱的主要作用有：1.抗脂肪肝：大鼠长期口服，可升高血及肝中的磷脂水平；可对抗四氯化碳引起的大鼠肝中磷脂、总胆固醇含量的减低，并有所提高；对BSP、SGPT、碱性磷酸酯酶、胆碱酯酶等试验均有所改善作用。已知枸杞对脂质代谢或抗脂肪肝有作用，甜菜碱作为其中含有的成分之一，在体内起甲基供应体的作用；2.降压：对麻醉动物有轻度降压作用，但对高血压无效；3.抗肿瘤：与D-异抗坏血酸配伍用药，在体外能抑制肿瘤细胞的有丝分裂，作用较单独用药为强；4.其它：其氯化物铝盐有抗溃疡作用及治疗胃炎、促进伤口愈合。迄今，尚未见有关甜菜碱预防和治疗饮食性肥胖的报道。

发明内容：

本发明的目的是提供甜菜碱的新的药用用途。更具体地，提供甜菜碱在制备预防和治疗饮食性肥胖药物中的应用。

本发明所述的甜菜碱(Betaine)是地黄提取物中的组分之一，具有式A的结构，与式B的左旋肉碱(l-carnitine)在结构上很相似，左旋肉碱比甜菜碱多一个次甲基和一个羟基。

本发明通过Atlantis HILIC Silica分析级色谱柱分析中药地黄各个组分，得甜菜碱的化合物，进行了甜菜碱对脂肪细胞分化的影响以及甜菜碱对饮食性肥胖的作用动物实验。实验结果显示，甜菜碱可以抑制脂肪细胞分化和脂肪细胞分化过程中关键转录因子的表达。表明甜菜碱具有预防高脂饮食诱导大鼠肥胖的作用，其作用机制包括：①抑制脂肪细胞分化从而抑制脂肪组织的增生：②促进l-carnitine的合成，从而促进l-carnitine参与脂肪酸氧化。

本发明所述的甜菜碱可以制备抑制脂肪细胞分化和预防饮食性肥胖的药物。

本发明的技术方案通过下述方法和步骤实现：

1.利用Atlantis HILIC Silica色谱柱(分析级)分析中药地黄提取物中的组分Hx；

2.培养细胞3T3-L1前脂肪细胞，用含0.5mM甲基异丁基黄嘌吟(Mix)、1μM地塞米松(Dex)和1μg/ml胰岛素(Insulin)诱导分化为成熟的脂肪细胞。并用Betaine处理细胞，Western Blotting检测C/EBPβ、C/EBPα和422/aP2的表达水平；

3.利用脂肪细胞模型，实验研究甜菜碱抑制脂肪细胞分化；

4.甜菜碱对饮食性肥胖的作用，建立高脂饮食(HFD)大鼠模型，经Betaine和l-carnitine(左旋肉碱)处理，测定大鼠的体重，喂养15周后将大鼠处死，测量脂肪组织的重量，分离血清，检测血清甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白浓度。

附图说明

图1是高效液相色谱分离图谱，

其中，采用Waters Atlantis HILIC Silica色谱柱，对Hx进行分离后，共得到六个组分。

图2是质谱图谱(质量范围100-900)，

其中，保留时间为8.90min的组分，其质谱谱图与甜菜碱标准品的质谱图相同，表明这个组分含有甜菜碱、甜菜碱类似物或由甜菜碱形成的盐类。

图3是前脂肪细胞培养，分化图，

其中，对照组细胞正常分化，而加入75mmol/L的甜菜碱溶液的细胞分化则受到了抑制，150mmol/L的甜菜碱溶液则几乎可以完全抑制3T3-L1前脂肪细胞分化为脂肪细胞。

图4是脂肪细胞特有基因表达产物鉴定(Western Blotting)，

其中，脂肪细胞分化早期的标志基因的C/EBPβ两种异构体中，18kD的条带并没有因为药物的加入而产生变化，38kD的条带则随着加药量的增多而表达水平逐渐降低，150mmol/L的甜菜碱溶液几乎完全可以抑制C/EBPβ 38kD蛋白质的表达水平；

脂肪细胞终末分化标志基因的C/EBPα两种异构体中，30kD和42kD的条带均随加药量的增多而表达水平逐渐降低，脂肪酸结合蛋白422/aP2的表达水平也随着加药量的增多而逐渐降低。

具体实施方式

通过下述实施例对本发明的技术方案作进一步的描述。