[发明专利]一种组织工程化雄激素分泌组织移植物

说明书

技术领域

本发明涉及医学和生物医学工程领域，更具体地涉及睾丸体细胞构建的组织工程化雄激素分泌组织。

背景技术

雄激素是男性特征性内分泌激素，主要由睾丸间质内的莱迪希细胞(Leydig cells，LC)合成和分泌，参与体内多种组织和细胞的代谢过程。各种原因导致的睾丸缺失或功能障碍，都会造成雄激素水平低下，对男性不同发育阶段生理及心理造成重要影响，最终导致患者的生活质量严重下降。近年来，随着生活节奏加快，工作压力增加，以及老龄化人口的增多，此类疾病的发病率有逐渐上升趋势。遗憾的是，针对雄激素缺乏性疾病，临床尚无安全有效的治疗措施。目前，较常用的方法是补充外源性睾酮。由于睾酮补充治疗无法达到人体有节律睾酮分泌的生理要求，最终常会引起红细胞增多、高血压、骨密度异常等一系列严重并发症。也有学者尝试同种异体睾丸移植和LC细胞治疗。但前者因移植物排斥反应、功能丧失及生精细胞伦理学等问题而无法广泛应用；后者则因LC来源有限、睾酮分泌功能迅速丧失以及缺乏适宜的生长载体和特异组织微环境等原因而限制其临床推广。组织工程技术为重建雄激素分泌组织提供了新途径。

组织工程技术能够将有功能的种子细胞与可降解生物材料复合，形成具有一定形态和生物学功能的细胞-材料复合物，随着细胞增殖和材料降解，发生组织重构，最终形成具有近似正常形态、组织学结构和生理功能的组织，完成组织器官的生理性重建。然而，目前国内外有关组织工程技术构建雄激素分泌组织的研究显示，组织工程方法构建雄激素分泌组织虽然在技术上可行，但构建组织移植体内后激素水平维持短暂，无法达到长期稳定的治疗效果。

可见，本领域迫切需要建立一种新的雄激素分泌组织构建技术，使新构建的雄激素分泌组织在体内可以长期稳定地发挥雄激素分泌功能。

发明内容

本发明旨在提供一种组织工程化雄激素分泌组织移植物。

本发明的另一个目的是提供一种构建组织工程化雄激素分泌组织的种子细胞。

本发明的再一个目的是提供上述组织工程化组织移植物和种子细胞的制备方法。

在本发明的第一方面，提供了一种组织工程化雄激素分泌组织移植物，它包括：(i)生物材料；和(ii)接种于所述生物材料的种子细胞，所述的种子细胞包括：莱迪希细胞(Leydig cells，LC)或含有LC的睾丸体细胞群。

在另一优选例中，所述的睾丸体细胞群中包含LC和谢尔托利细胞(Sertolicells，SC)，其数量比为1∶0.01-30；其中LC和SC占细胞群总量的50-100％。

在另一优选例中，LC和SC的数量比为1∶0.1-1。

在另一优选例中，睾丸体细胞群中还包括数量为0-50％的肌样细胞。

在另一优选例中，所述的LC和SC占细胞群总量的90-100％。

在另一优选例中，所述的睾丸体细胞群取自哺乳动物。

在另一优选例中，所述的睾丸体细胞群取自小鼠、大鼠、兔、猴、狗、猫、羊、猪、牛、人。

在本发明的第二方面，提供了上述移植物的制备方法，即将(i)生物材料；和(ii)种子细胞混合得到本发明提供的组织工程化雄激素分泌组织移植物，所述的种子细胞包括：LC或含有LC的睾丸体细胞群。

在另一优选例中，所述的生物材料包括(但并不限于)：(1)可降解生物材料；(2)不可降解生物材料。

在另一优选例中，所述的制备方法包括步骤：

a.将(ii)种子细胞，接种于(i)生物材料上；

b.待(ii)种子细胞良好地粘附于(i)生物材料上后，体外培养或体内移植，得到如权利要求1所述的组织工程化雄激素分泌组织移植物，所述的种子细胞包括：LC或含有LC的睾丸体细胞群。

在另一优选例中，所述的制备方法为：将种子细胞接种于可降解生物材料上，待种子细胞良好地粘附于生物可降解材料上后，即刻或体外培养一定时间后包裹于可降解或不可降解生物材料内核表面，形成具有一定形态的组织移植物，体外培养或体内移植。

在另一优选例中，体外培养时间为0小时-15天，优选7-15天，更优选7天。

在另一优选例中，体内移植前先行体外培养0小时-15天后体内移植，优选体外培养2小时-7天后体内移植，更优选体外培养2小时-4小时后体内移植。

在另一优选例中，体内移植优选同种异体移植，再优选同基因个体移植，更优选自体移植。

在另一优选例中，所述的雄激素分泌组织移植物的体内移植部位包括(但不限于)：全身皮下、肌肉组织内、腹腔内、大网膜内、肾包膜内、睾丸鞘膜腔内、睾丸原位皮下、腹股沟内。