[发明专利]一种毒死蜱农药降解菌、其菌剂和制备方法

权利要求书

1.一种毒死蜱农药降解菌，其特征在于所述降解菌为枝孢菌属Cladosporium sp.的Hu-01菌株，菌种保藏号为CCTCC M 207111，该菌株ITS序列分析的Genebank登陆号为EF405864。

2.一种实现权利要求1所述毒死蜱农药降解菌的方法，其特征在于包括以下步骤：菌种采用砂土管保存法保存，将毒死蜱农药降解菌Hu-01的菌种在培养皿上活化，接种于试管斜面，按照以下配方配制查彼氏培养基：硝酸钠：2.0g，氯化钾：0.5g，硫酸镁：0.5g，磷酸氢二钾：1.0g，硫酸铁：0.01g，蔗糖：30.0g，蒸馏水：1000mL，在pH7.0的液体查彼氏培养基中，接入0.1g湿菌体，在28℃，150r/min的摇床中培养1-7d。

3.一种采用权利要求1所述毒死蜱农药降解菌制备降解菌剂的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)将毒死蜱农药降解菌Hu-01的菌种在培养皿上活化，接种于试管斜面；

(2)将毒死蜱农药降解菌Hu-01的斜面种接种于查彼氏培养基摇瓶中，振荡培养至对数期；

(3)将步骤(2)菌种按照8％～10％的接种量种入种子罐，培养至对数生长期；

(4)将到达对数期种子液按照8％～10％的接种量接种入生产罐培养；

(5)培养液经离心取上清得菌液，菌液立即加入保护剂，分装成液体剂型。

4.根据权利要求3所述制备降解菌剂的方法，其特征在于步骤(3)所述种子罐培养条件为无菌空气的通气量为45～60L/min，搅拌速度为200～300转/分，温度28℃。

5.根据权利要求3所述制备降解菌剂的方法，其特征在于步骤(3)种子罐所用的培养基配方为NaNO₃ 0.2％，K₂HPO₄ 0.1％，KCl0.05％，MgSO₄ 0.05％，Fe₂(SO₄)₃ 0.001％，蔗糖3％，蛋白胨0.5％。

6.根据权利要求3所述制备降解菌剂的方法，其特征在于步骤(3)所述种子罐按容积量80％投料，投料完成后在1.1kg/cm³的压力、121℃条件下灭菌，冷却至28℃后备接种。

7.根据权利要求3所述制备降解菌剂的方法，其特征在于步骤(4)所述生产罐的培养条件是无菌空气的通气量为0.45～0.60m³/min，搅拌速度为100～200转/分，培养温度为26～30℃，培养时间为88～96小时。

8.根据权利要求3所述制备降解菌剂的方法，其特征在于步骤(4)所述生产罐所用的培养基配方为NaNO₃ 0.2％，K₂HPO₄ 0.1％，KCl 0.05％，MgSO₄ 0.05％，Fe₂(SO₄)₃ 0.001％，蔗糖3％，蛋白胨0.5％。

9.根据权利要求3所述制备降解菌剂的方法，其特征在于步骤(4)所述生产罐按照投料量∶容量＝0.08～0.1∶1的比例投料，投料后在1.1kg/cm³的压力、121℃条件下灭菌，冷却至28℃后，通无菌空气保持无菌状态备接种。

10.根据权利要求3所述制备降解菌剂的方法，其特征在于步骤(5)所述保护剂组成为氯化钠质量分数为0.7％，甘氨酸质量分数为0.35％，苯甲酸钠质量分数为0.03％，凯松体积分数为0.17076％，甘油的体积分数为8.37801％。