[发明专利]一种从红豆杉中分离提取10－去乙酰基巴卡丁Ⅲ的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从红豆杉中分离提取10-去乙酰基巴卡丁III的方法，属有机化学技术领域。

背景技术

随着环境污染问题日益严重，癌症发病率逐年上升，癌患人群不断扩大，治癌药物的需求量，特别是疗效确切的治癌新药的需求量每年也以较高的速度增长。

1979年，生化药理教授Su.Horwity研究发现了紫杉醇具独特的抗癌作用机理，各国对此进行了研究并取得了一定的成果。据美国肿瘤研究所(NCI)调查认为，紫杉醇及多西紫杉醇将是人类未来二十年间最有效的抗癌药物。这样就为抗癌新药紫杉醇提供了巨大的市场空间。据美国施贵宝公司统计，1999年该公司的紫杉醇针剂全年销售额达到2.5亿美元，到2000年国际紫杉醇市场原料药贸易额突破15亿美元。目前，美国几家大的化学制药公司及欧洲部分国家的药业公司正在全球范围内广泛寻求合作，以求建立自己的药源供应基地。

红豆杉属植物属珍稀濒危植物，产地及产量较少且植物体内紫杉醇含量较少。因此，从植物红豆杉(包括其他同系物种)中提取紫杉醇，获得紫杉醇的量相当少，远远不能满足医药行业的需求，为此有关的药物研究人员致力于开拓紫杉醇的合成与半合成之路，以扩大紫杉醇的来源，并成功利用紫杉醇的前体10-去乙酰基巴卡丁III(10-DAB III)为原料来半合成紫杉醇或紫杉醇的类似物如多西紫杉醇等，其抗癌活性及水溶性均优于紫杉醇，并有望很快进入工业化。

10-去乙酰基巴卡丁III是从红豆杉中分离出的天然有机化合物，是紫杉系列产品中重要的中间体，被用于半合成紫杉醇及紫杉醇类化合物，其分子式如下：

目前存在的问题是如何利用现有的资源能工业化地提取足够多地半合成的原料，即获得高纯度10-DAB III精品，为此，医药界的有关人士期望生物工程方面的专家探索一条从植物红豆杉中能高效地提取和纯化10-DAB III地工业化之路，以推动和支持抗肿瘤医药工业的技术进步。

中国专利(ZL03129635.1)公开了一种从红豆杉中分离提取10-去乙酰基巴卡丁III的方法。该方法首先将红豆杉枝叶粉碎至粒径小于10μm，然后用醇类溶剂提取有效成分，蒸发浓缩除醇，经有机溶剂萃取，再经硅胶柱层析，常压色谱柱层析，水解后再次层析得到10-去乙酰基巴卡丁III。可见，该提取方法非常复杂。

中国专利(ZL02136678.0)公开了一种从红豆杉枝叶残渣中分离提取10-去乙酰基巴卡丁III的方法。该方法使用种植的红豆杉的树叶、树枝被提取出紫杉醇后的残渣，经过常温至70℃干燥脱除废渣中的有机溶剂，将残渣放入提取罐，加入水后，在40-80℃下浸泡2-8小时；水与废渣的重量比在2-5之间；残渣浸泡后趁热过滤去除废渣，滤液浓缩后得到10-去乙酰基巴卡丁III的粗提物；用喷雾干燥仪将10-去乙酰基巴卡丁III粗提物喷雾干燥，得到的干粉末用乙酸乙酯溶解色谱分离。

使用传统的硅胶层析，其提取工艺得率低，从枝叶到95％产品的一次收率只有55％左右；产品含量低，产品纯度一般只能达到95％，对后续的分离工作造成了麻烦；颜色差，产品质量不高，从而影响了产品质量；硅胶不能多次重复使用成本很大，氯仿做为洗脱溶剂毒性非常大对操作人员有很强的身体伤害。

发明内容

本发明的目的是提供一种工艺简单，10-去乙酰基巴卡丁III提取率高，价格低廉，无毒无污染的工业化生产方法。

10-DABIII是合成抗癌药紫杉醇和多西紫杉醇的母体，它的工业化程度和成本从某种意义上讲直接决定了合成紫杉醇和多西紫杉醇的工业化程度和成本。然由于10-DABIII在原植物中的含量通常在100ppm-1000ppm之间，要从成吨的植物里面提取100克-1000克的成品，其在分离过程中所花费的有机溶剂成本之大主要集中在含量富集到50％以前，因此，降低成本的关键是将10-DABIII从ppm级分离到50％左右的粗品过程。

本发明实现过程如下：

首先用醇类溶剂提取红豆杉枝叶，得到的提取液进行蒸发浓缩得浓缩液或干粉，再经分离纯化。

在分离纯化过程中，浓缩液或干粉先过聚酰胺柱初次分离，使用乙醇或甲醇溶液梯度洗脱得粗品；粗品用硅胶柱色谱二次分离并结晶干燥。