[发明专利]蚕蛹α－亚麻酸超临界CO2萃取分离纯化方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种天然生物活性成分的提取及纯化的方法，具体涉及一种可应用于大规模生产的蚕蛹α-亚麻酸超临界CO₂萃取分离纯化方法。

背景技术：

纯天然生物蚕蛹α-亚麻酸的生理与药理作用及应用。α-亚麻酸(α-Linolenic acid，α-LNA)是人类生命的核心物质，为ω-3系列多不饱和脂肪酸，是维系人类脑进化、大脑皮质功能、视网膜、睾丸及精子中乙醇胺磷脂和神经磷脂转化、代谢功能的生命核心物质，为体内ω-3系列多烯脂肪酸EPA和DHA的良好供体。α-LNA在人体内不能合成，必须从体外摄取。1990年3月，华盛顿ω-3系列多不饱和脂肪酸国际会议上确认α-LNA为对人体非常重要的人体“必需脂肪醇”。早在1978年，联合国粮农组织宣布将其作为人类食物中的“必需脂肪酸”。人体一旦长期缺乏α-LNA，将导致脑器官、视觉器官功能衰退和老年性痴呆发生，并引起高血脂、高胆固醇、高血压及癌症等疾病的发病率上升。目前，国外在美国国立癌症研究所(NCI)已将α-LNA列为防癌抗癌保健功能食品上市；日本亦作为防癌保健品上市；德、日等国家将α-LNA作为药物及食品添加剂开发多项专利。近年来，α-LNA对神经系统的功能研究，如改善记忆力、改善学习能力、抑制动脉硬化引起的痴呆症、抑制阿尔茨海默氏症即老年性痴呆、改善视力等功能引起极大关注。利用超临界CO₂萃取蚕蛹α-亚麻酸的工艺与传统的有机溶剂萃取法和压榨法相比，具有提取率高，操作温度低，可避免蚕蛹蛋白和不饱和脂肪酸的破坏；利用尿素包合法分离纯化α-亚麻酸与传统工艺相比，该法工艺比较成熟，所需设备相对简单，成本低廉，尿素包合物形成后，还可有效地保护双键不受氧化，能较完全地保留其生物活性，是大规模分离、富集各种不饱和脂肪酸的理想方法。

发明内容：

本发明提供了一种蚕蛹α-亚麻酸分离纯化方法，目的在于解决传统提取纯化方法中提取率低、α-亚麻酸破坏程度大、费用高等缺点。

本发明的技术方案如下：

一种蚕蛹α-亚麻酸分离纯化方法，采用超临界CO₂萃取工艺，步骤如下：

a.以天然生物蚕蛹为原料，取蚕蛹干粉置萃取釜中，以超临界CO₂为萃取剂，在萃取压力20～40MPa、萃取温度为40～60℃的条件下萃取0.5～5.0h；在解析压力4.0～12MPa、解析温度30～60℃进行解析，得蛹油。

b.取蛹油置于釜中，加入氢氧化钠醇溶液，在30-75℃条件下搅拌0.5～24h，加水至溶液澄清，调pH为1.0～5.0，溶液用有机溶剂萃取，取有机溶剂层用水洗至中性，干燥，得混合脂肪酸。

c.将混合脂肪酸按照混合脂肪酸和尿素为1∶4～1∶12的质量比加入浓度为20％～55％wt尿素的甲醇溶液中，于-15～-20℃条件下搅拌包合12～36h，过滤，滤渣用甲醇洗涤，干燥，即得。

上述的步骤b.中氢氧化钠乙醇溶液的浓度为1.7％～6.5％(w/v)。

优选的各步骤条件如下：

所述步骤a.中，蚕蛹干粉300g置1L萃取釜中，萃取压力25MPa、萃取温度为55℃，萃取2.5h；解析压力6.0MPa、解析温度40℃。

所述步骤b.中，加入氢氧化钠乙醇溶液，在65℃条件下搅拌2h。

所述步骤b.中，调pH为2.5。

所述步骤b.中，有机溶剂为正己烷。

所述步骤c.中，混合脂肪酸和尿素为1∶10的质量比。

所述步骤c.中，尿素的甲醇溶液浓度为30％wt。

所述步骤c.中，搅拌包合24h。

本发明优点是低温操作，可避免多不饱和脂肪酸破坏、产品质量纯度高、萃取时间短、操作简单方便，与传统的溶剂法(如石油醚法)和压榨法相比，具有收率高、工作效率高、CO₂可重复利用、无残留溶剂、产品质量高、工艺方法技术含量高、简单通用的优点，是一种有效、经济、可应用于工厂机械化大规模生产天然尘物活性成分的提取纯化工艺。

具体实施方式

以下实施例进一步说明本发明，本发明不受此限制。

实施例1

a.以天然生物蚕蛹为原料，取蚕蛹粉碎、干燥得干粉，取干粉300g置1L萃取釜中，以超临界CO₂为萃取剂，在萃取压力25MPa、萃取温度为55℃的条件下萃取2.5h；在解析压力6.0MPa、解析温度40℃进行解析，得蛹油。