[发明专利]用于诱导未成熟单核细胞的树突细胞的激活的组合物和方法

说明书

相关应用

本申请要求2005年12月8日提交的美国临时申请60/748,885 的优先权，通过引用将其包含入本文。

发明背景

抗原递呈细胞(APC)在引发有效的免疫反应中是非常重要的。它 们不仅将抗原呈递至具有抗原特异性T细胞受体的T细胞，而且还提 供了T细胞激活所必需的信号。这些信号仍未完全确定，但牵涉许多 细胞表面分子和细胞因子或生长因子。幼稚型T细胞的激活和极化所 必需的因子可以与记忆性T细胞的再激活所需的因子不同。APC为T 细胞提供抗原和递送信号的能力通常称为辅助细胞功能(accessory cell function)。尽管已显示单核细胞和B细胞是感受态(competent) APC，但它们的体外抗原呈递能力似乎限于之前致敏的T细胞的再激 活。因此，单核细胞和B细胞不能直接功能性激活幼稚型或未接触抗 原的T细胞群体。它们也不能递送可极化诱导的免疫反应或当其被诱 导的时的免疫反应的信号。

树突细胞(DC)是免疫系统的据认为能够激活幼稚型和记忆性T 细胞的专职抗原递呈细胞。日益增多地离体制备树突细胞以用于免疫 治疗，特别是癌症的免疫治疗。具有最佳免疫刺激性质的树突细胞的 制备需要理解和利用这些细胞的生物学知识以用于进行离体培养。已 描述了用于这些细胞培养的各种方案，所述方案具有归于各方案的不 同有利方面。最近的方案包括无血清培养基的使用，赋予培养的细胞 以希望的免疫刺激性质的成熟条件的应用。

树突细胞的激活起始了将未成熟DC(其表型与皮肤郎格汉斯细胞 相似)转变成成熟的、能够迁移至淋巴结的抗原递呈细胞的过程。该 过程导致表征未成熟树突细胞的强抗原摄取能力的渐近和累进丢失以 及导致共刺激细胞表面分子和各种细胞因子的表达上调。不同的刺激 物可起始DC的成熟。该过程非常复杂且在体外至少可花费48小时才 能完成。成熟的一个其他结果是细胞的体内迁移性质的改变。例如， 成熟诱导几个趋化因子受体，包括CCR7，所述受体指导细胞至引流淋 巴结的T细胞区域，在该区域成熟DC激活T细胞，所述T细胞抗DC 表面呈递的I类和II类MHC分子背景中的抗原。术语“激活”和“成 熟”以及“激活的”和“使成熟”描述了诱导和完成从未成熟DC(部 分特征在于摄取抗原的能力)至成熟DC(部分特征在于有效地刺激从 新形成的T细胞反应的能力)的转变。所这术语在本领域内通常可互 换使用。

已知的成熟方案基于据认为DC在暴露于抗原期间或之后遇到的 体内环境。该方法的最佳实例是将单核细胞条件化的培养基(MCM)用作 细胞培养基。通过培养单核细胞在体外产生MCM，并且将其用作成熟 因子的来源。(参见例如，美国2002/0160430，通过引用包含入本文)。 MCM中负责成熟的主要成分据报导为(促)炎症细胞因子白细胞介素1 β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNFα)。

因此可通过许多不同的因子触发DC的成熟，所述因子通过宿主 参与信号转导途径。作为结果，不存在单一的成熟途径或结果，但事 实上存在许多成熟DC策略，其各自具有它们自身的独特的功能特征。 从概念上来说这是这个道理，因为免疫系统必须对其作出反应的对身 体的各种威胁是多方面的，因此这需要不同的攻击策略。例如，在通 过补充以特定抗体的、激活的巨噬细胞充分清除细菌感染，通过有效 地杀死病毒感染的细胞的细胞毒性T细胞充分攻击病毒感染的时候。 癌细胞的杀死通常牵涉细胞毒性T细胞、天然杀伤细胞和抗体的结合。