[发明专利]细胞培养基容器组件

说明书

技术领域

本发明关于细胞培养基领域，更具体地说，关于具有收缩包装 光保护标签(shrink-wrap light protection label)以用于储存细胞培养基 的细胞培养基容器。

背景技术

细胞培养基用于在生物体外，通常在实验室中(术语是体外； 拉丁语为“玻璃中”)维持细胞的存活。其由无菌的营养系统组成；通 常是有机和无机物质的复杂的混合物。通常加入蛋白生长因子促进细 胞生长或其它具体的行为。加入添加物以保护细胞抵御微生物或稳定 环境。

细胞培养基一般储存在有螺旋盖的的透明塑料或玻璃瓶中，或 在一些情况下，储存于袋子中。标记通常由粘贴纸或塑料基标签构成， 它们覆盖容器有限的面积(一般小于容器表面积的25％)。

培养基以液体的形式被加入到细胞。当活细胞代谢培养基的组 分时，耗尽关键组分并产生废物，这需要经常替换培养基。

作为液体，培养基应该在冰箱的温度下储存，并且遮蔽光照。 低温减慢蛋白变性的正常速度，蛋白变性能够耗尽关键的培养基组分。 防止可见光是必要的，因为光曝露导致涉及核黄素、硫醇、金属离子 和其它的组分的光反应，光反应能够通过各种机制降解组分和产生损 伤细胞的活性氧物质(ROS)(参见Grzelak等人，“Light-dependent generation of reactive oxygen species in cell culture media”，Free radic. Biol.Med.12：1418-1425；2001)，从而导致DNA的修饰或突变。已经发 现房间的荧光灯产生光毒性产物，包括过氧化氢(参见Stoien等人， “Effect of near-ultraviolet and visible light on mammalian cell in culture II. Formation of toxic photoproducts in tissue culture medium by blacklight”， Proc.Natl.Acad.Sci.USA.71：3961-3955；1974；Wang等人，“Effect of room fluorescence light on the deterioration of tissue culture medium”，In Vitro.12：19-22；1976；和Wang等人，“Identification ofhydrogen peroxide as photoproduct toxic to human cells in tissue-culture medium irradiated with“daylight”fluorescent light”，In Vitro.14：715-722；1978)。普通的培养 基组分如色氨酸、酪氨酸、吡哆素和叶酸能够增强这些反应(参见 Grazelak等人，见上)。培养基中血清的存在已经在过去减小了由光产 生的ROS造成的问题。然而，在当今通常用于哺乳动物细胞培养的不 含血清或低血清的确定成分培养基中，ROS产生的细胞毒性更加普遍。

培养基在37℃下被用于哺乳动物细胞，以给细胞代谢的发生提 供期望的环境。在太低的环境下使用培养基会使细胞休克，造成代谢 抑制或生存力降低。为了避免这些问题，在用于细胞前，细胞培养基 通常被加热。一般地，细胞培养基通常在水浴中加热，通过将含有培 养基的容器浸入预加热到预定温度的“水浴”中的水中。如果需要小 体积的培养基，技术人员将部分培养基从原始的容器转移到另外一个 灭菌的容器中(利用无菌技术)或者通过在水浴中加热整个原始瓶子。目 前，对细胞培养技术人员来说，通常的实践是估计容器内的培养基何 时达到合适的温度。这通常通过定时或通过触摸容器的外面来确定是 否它已“感觉”到合适的温度。如果技术人员错误地估计培养基的温 度，细胞代谢可能被抑制，生存力降低，或在极端的情况下由于短时 间内培养基温度的巨大变化造成休克缘故，细胞死亡。

在培养基加热过程中，因为培养基容器被直接暴露于水浴中没 有灭菌的水中，污染可能会发生。存在于水浴中的非无菌水中的细菌、 霉菌、酵母和其它的微生物留在培养基容器中的外部，并可能从培养 基容器的外部被带到无菌的环境中，如生物安全柜，在此，加热的培 养基被转移到细胞培养物中。技术人员通常通过用杀菌液如70％的异 丙醇洗涤培养基瓶的外部使这种危害最小。