[发明专利]通过测量粪便样品中血红蛋白和M2－PK的评定结肠直肠癌的方法

说明书

本发明涉及帮助评估结肠直肠癌的方法。所述方法特别是用于体 外地评估结肠直肠癌的不存在或存在。例如，该方法通过分析生物化 学标记物来实践，包括测量粪便样品中血红蛋白和M2-PK的浓度、并 将测定的浓度与结肠直肠癌的不存在或存在相关联。为了进一步改善 本发明的方法中结肠直肠癌的评估，可以与粪便样品中的血红蛋白和 M2-PK一同测定一种或多种另外的标记物的水平，并与结肠直肠癌的 不存在或存在相关联。本发明还涉及包含血红蛋白和M2-PK的标记物 组(panel)在结肠直肠癌的早期诊断中的用途，它教导了用于进行本 发明的方法的试剂盒。

发明背景

粪便或粪便样品在各种疾病的诊断中通常被测试寄生虫、脂肪、 潜隐血、病毒、细菌和其他有机体和化学物质的存在。

尽管在检测和治疗方面有进展，癌症仍然是主要的公众健康挑战。 在各种类型的癌症中，结肠直肠癌(＝CRC)是西方世界最常见的癌症 之一。

癌症的分期是就程度、发展和严重度而言的疾病的分类。它将癌 症患者分组，从而关于预后和治疗选择可以进行普遍化。

当今，TNM系统是癌症的解剖学范围上最广泛使用的分类法。它 代表了国际公认的、统一的分期系统。其中有三种基本变量：T(原发 肿瘤的程度)、N(区域性淋巴结的状态)和M(远距离转移的存在或 不存在)。由UICC(International Union Against Cancer)，Sobin，L.H.， Wittekind，Ch.(eds)，TNM Classification of Malignant Tumours，第五 版，1997公开了TNM指标。

特别重要的是，CRC的早期诊断转变为好得多的预后。结肠直肠 的恶性肿瘤来自于良性肿瘤，即，来自腺瘤。因而，最好的预后是在 腺瘤阶段诊断出的那些患者。在早至阶段Tis，N0，M0 or T1-3；N0； M0诊断的患者如果适当地治疗，在诊断后有超过90％的5年存活机会， 相比较的，当已经存在远距离转移时诊断的仅10％的5年存活率。

在本发明的意义上，评定CRC的存在或不存在的方法特别适合于 在前恶性状态(腺瘤)或在完全没有转移(即没有近端也没有远端的) 的肿瘤阶段，即在UICC分类I、II或III时CRC的敏感检测。

根据本发明的诊断方法基于来自个体的粪便样品。提取粪便样品， 通过使用特异结合试剂分别地从这种处理过的粪便样品特异性地测量 血红蛋白和M2-PK。

癌症被检测/诊断越早；总体存活率越好。这对于CRC是特别符合 的。在肿瘤的发展阶段中的预后是不良的。在诊断后五年内超过三分 之一的患者将死于进行性疾病，相应于约40％的五年存活率。当前的 治疗仅仅治愈一小部分患者，对于在疾病的早期阶段诊断的那些患者 明显具有最好的效果。

对于作为公众健康难题的CRC，必须的是开发对于结肠直肠癌的 更有效的筛选和预防措施。

当前对于结肠直肠癌可用的最早期的检测过程涉及使用便血测试 或内窥镜操作。然而，在检测出便血之前一般必须有显著的肿瘤大小。 对于根据粪便样品的CRC检测，当前的技术已经很长时间是基于愈创 木脂的粪便潜隐血测试。

作为根据粪便的CRC筛选分析，愈创木脂测试是当前最广泛使用 的。然而，愈创木脂测试具有不良的敏感性和不良的特异性。基于愈 创木脂的粪便潜隐血测试的敏感性是～26％，其意味着具有恶性病变的 74％的患者将仍未被测出(Ahlquist，D.A.，Gastroenterol.Clin.North Am. 26(1997)41-55)。前癌性和癌性病变的可视化是早期检测的最好方 法，但是结肠镜检查是侵入性的，具有显著的费用、风险和并发症 (Silvis，S.E.，等人，JAMA 235(1976)  928-930；Geenen，J.E.， 等人，Am.J.Dig.Dis.20(1975)231-235；Anderson，W.F.，等人， J.Natl.Cancer Institute 94(2002)1126-1133)。

粪便收集是非侵入性的，因而对于测试儿童或老年患者、对于远 离临床位置的测试、对于频繁重复的测试和对于确定可能在消化道中 发现的被分析物的存在是理论上理想的。

然而，分析粪便样品的免疫分析技术的应用因为几个理由已经被 证明是困难的。