[发明专利]粒细胞集落形成刺激因子(G－CSF)的突变体及其化学缀合多肽

权利要求书

1.人粒细胞集落形成刺激因子(G-CSF)的突变体，所述突变体包括SEQ ID NO：3中确定的氨基酸序列，其中具有SEQ ID NO：1中确定的氨基酸序列的G-CSF位置133处的苏氨酸(Thr)残基被半胱氨酸(Cys)残基取代。

2.人G-CSF的缀合突变体，所述突变体包括SEQ ID NO：3中确定的氨基酸序列，其中包括SEQ ID NO：1中确定的氨基酸序列的G-CSF的位置133处的苏氨酸(Thr)残基被半胱氨酸(Cys)残基取代，且所取代的Cys残基连接于非蛋白化学化合物。

3.权利要求2的缀合突变体，其中所述突变体是蛋白质，其包括SEQID NO：4中确定的氨基酸序列，所述氨基酸序列的位置17处的半胱氨酸(Cys)残基被丝氨酸(Ser)残基取代。

4.权利要求2或3的缀合突变体，其中所述非蛋白化学化合物是选自由下列各项组成的组中的一种的化合物：聚乙二醇(PEG)，聚乙烯醇(PVA)，聚羧酸和聚乙烯吡咯烷酮，其与选自包括下列各项的组的一种结合：马来酰亚胺，乙烯砜，碘乙酰胺和邻吡啶基二硫化物。

5.权利要求2或3的缀合突变体，其中所述非蛋白化学化合物具有在约2-约100kDa范围内的分子量。

6.权利要求4的缀合突变体，其中所述PEG具有在约5-约100kDa范围内的分子量。

7.人粒细胞集落形成刺激因子(G-CSF)的突变体，所述突变体包括SEQ ID NO：5中包括的氨基酸序列，其中半胱氨酸(Cys)残基被插入到包含于SEQ ID NO：1的G-CSF的位置135处的甘氨酸(Gly)残基和位置136处的丙氨酸(Ala)残基之间。

8.人粒细胞集落形成刺激因子(G-CSF)的缀合突变体，所述突变体包括SEQ ID NO：5中包括的氨基酸序列，其中半胱氨酸(Cys)残基被插入到包含在SEQ ID NO：1中包含的氨基酸序列的G-CSF的位置135处的甘氨酸(Gly)残基和位置136处的丙氨酸(Ala)残基之间，且非蛋白化学化合物连接于插入的半胱氨酸残基。

9.权利要求8的缀合突变体，其中所述突变体是蛋白质，其包括SEQID NO：6中包括的氨基酸序列，所述氨基酸序列的位置17处的半胱氨酸残基被丝氨酸(Ser)残基取代。

10.权利要求8或9的缀合突变体，其中所述非蛋白化学化合物是选自包括下列各项的组中的一种的化合物：聚乙二醇(PEG)，聚乙烯醇(PVA)，聚羧酸和聚乙烯吡咯烷酮，其与选自包括下列各项的组的一种结合：马来酰亚胺，乙烯砜，碘乙酰胺和邻吡啶基二硫化物。

11.权利要求8或9的缀合突变体，其中所述非蛋白化学化合物具有在约2-约100kDa范围内的分子量。

12.权利要求10的缀合突变体，其中所述PEG具有在约5-约100kDa范围内的分子量。