[发明专利]提供容易获得的源于外周血的细胞材料的方法及其组合物

说明书

技术领域

本发明涉及在TVEMF-生物反应器中制备的来自外周血的成体干细胞、以及这种制备方法、其组合物和使用所述细胞或组合物治疗哺乳动物的方法。

技术背景

哺乳动物尤其是人体组织的再生长期以来是医学界的理想。迄今，人体组织的修复很大程度上通过移植来自供体的相似组织已经实现。基本上始自从双胞胎Herrick中一个向另一个的肾脏移植，以及后来南非医生Christian Barnard在1967年12月3日完成的从Denise Darval向Louis Washkansky的全世界著名的心脏移植，组织移植成为了用于延长晚期患者寿命的广泛接受的方法。

人体组织移植从它的最初应用开始就遇到了重大问题，主要是由于身体的自然免疫系统而产生的组织排斥。这通常造成应用组织移植时生命的延长非常有限(Washkansky手术后只活了18天)。

为了克服身体免疫系统的问题，很快开发出了许多抗排斥药(比如Imuran、环孢霉素)以抑制免疫系统并因此延长组织在排斥之前的应用。但是，排斥问题仍然产生对组织移植替代方法的需求。

骨髓移植也有应用，并且仍是治疗一些疾病比如白血病的所选择疗法，以修复某些组织比如骨髓，但是骨髓移植也存在问题。它需要供体匹配(不到50％能找到)；它会引起疼痛，且昂贵并具有风险。因此，骨髓移植的替代方法是非常希望得到的。组织干细胞的移植比如在美国专利No.6,129,911中的肝脏干细胞移植也有类似的限制，使得它们的广泛应用存在疑问。

近年来，研究人员试验了应用多能性胚胎干细胞作为组织移植的替代手段。应用胚胎干细胞背后的理论是它们在理论上能够用于再生身体内几乎任何组织。然而，胚胎干细胞在组织再生上的应用也遇到了问题。在这些问题中较为严重的有，所移植的胚胎干细胞的可控性受到限制，它们有时生长成肿瘤，并且可用于研究的人胚胎干细胞被患者的免疫系统所排斥(Nature，June 17，2002：Pearson，“Stem Cell Hopes Double”，news@nature.com，published online：21June 2002)。另外，胚胎干细胞的广泛应用受到伦理、道德、和政治因素的阻碍，使得它的广泛应用仍然是存在疑问的。

干细胞的多能性特点是首先在从骨髓中找到的成体干细胞中发现的。Verfaille，C.M.et al.，Pluripotency of mesenchymal stem cellsderived from adult marrow.Nature 417，published online 20 June；doi：10.1038/nature00900，(2002)cited by Pearson，H.Stem cellhopes double.news@nature.com，published online：21 June 2002；doi：10.1038/news020617-11.

Boyse et al.，美国专利No.6,569,427 B1公开了低温保存以及低温保存的胎儿和新生儿血液可用于治疗或预防多种疾病与病症比如贫血、恶性肿瘤、自身免疫疾病、和多种免疫功能障碍及缺陷。Boyse还公开了造血重建在使用异源基因序列的基因疗法中的应用。但是，Boyse的公开由于缺乏用于治疗的细胞扩增而停止。CorCell，一个脐带血库，提供了对脐带血干细胞的扩增、低温保存、和移植的统计。”Expansion of Umbilical Cord Blood Stem Cells”，InformationSheet Umbilical Cord Blood，CorCell，Inc.(2003).一种扩增方法公开了应用一种生物反应器，该生物反应器带有位于中央的基于胶原蛋白的基质。Research Center Julich：Blood Stem Cells from theBioreactor.Press release May 17，2001。

研究继续致力于阐明有关干细胞扩增的分子机制。例如，CorCell的文章公开了被命名为Delta-1的信号分子有助于脐带血干细胞的发育。Ohishi K.et al.，Delta-1 enhances marrow and thymusrepopulating ability of human CD34+/CD38-cord blood cells.Clin.Invest.110：1165-1174(2002)。