[发明专利]食源性寄生虫病快速酶免疫检测方法及检测盒

权利要求书

1.一种食源性寄生虫病快速酶免疫检测方法，用于猪囊虫、肺吸虫、肝吸虫和旋毛虫病的酶免疫检测，其特征在于：酶免疫检测用试剂包括抗原包被板A、酶结合物液B、洗涤液C、底物D、显色剂E、样品稀释液F、终止剂G、阳性对照品H及阴性对照品I，检测过程使用多孔检测盒，具体过程包括：

(1)样本稀释：用样本稀释液F将待检血清按体积比1∶50稀释，阴阳性对照血清同比例同步稀释，然后

(2)加样反应：每孔加已稀释血清100ul，同时设阴性、阳性及空白对照各一孔，空白对照孔加入100ul样品稀释液F，37℃静置10分钟，甩去，每孔加洗涤液C一滴，立即用蒸馏水洗涤多次，甩去，拍干，再

(3)加酶反应：加酶结合物B二滴，37℃反应10分钟，甩去，加洗涤液C一滴，立即用蒸馏水反复洗涤多次，甩去，拍干，最后

(4)显色反应：加底物D和显色剂E各一滴，混匀，室温下放置2-3分钟，待阴性对照孔微呈蓝色时，加终止剂G一滴混匀，终止反应，肉眼观察浅于近于阴性对照为阴性，呈明显深于阴性对照的蓝色为阳性，用仪器判断：以空白对照调零于630nm读取0.D值，待检孔0.D值大于阴性对照2.1倍者为阳性，当阴性对照0.D值低于0.07时按0.07计算。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：抗原包被板A采用快速包被工艺，预先在通用聚苯乙烯微孔板上包被抗原，包被液为含抗原的碳酸盐缓冲液(由碳酸氢钠与碳酸钠组成，PH9.60，0.05M)，室温静止12小时，用1％牛血清白蛋白封闭2小时，冷冻真空干燥，真空装袋封口。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：酶结合物B液磷酸盐缓冲液(由磷酸二氢钠与磷酸氢二钠组成，PH7.0，0.05M)，添加稳定剂分子量Mr为20000的聚乙二醇重量0.5％-5％，同时添加加速剂分子量Mr为6000的聚乙二醇重量0.5％-5％，加万分之一硫柳汞以及四种寄生虫病统一的抗人免疫球蛋白G辣根过氧化物酶标记结合物。

4.权利要求1的检测方法所使用的多孔检测盒，其特征在于：多孔检测盒是一种可以扣合的四合一化的试剂盒，盒内分为两个区，一个区放置多种寄生虫抗原预包被板，共多块紧邻液体试剂瓶，另一区设置一个开孔纸托或塑料基托立式并行放置多种通用的液体试剂瓶，试剂盒上方有开口，内侧盖上各有一个孔，分别插放阴性和阳性对照血清。