[发明专利]浓缩抗体的方法及其治疗性产品

说明书

发明背景

分离、纯化和浓缩生物材料的方法是已知的，包括例如色谱、超滤和冷 冻干燥，一般性地参考，R.Hatti-Kaul等，″Downstream Processing in  Biotechnology，″于《Basic Biotechnology》，第9章，187-211页，第二版， Cambridge University Press(2001)。制备用于人体施用的浓缩单克隆抗体制剂 的方法是已知的，参见例如美国专利6,252,055，其利用超滤，并使所得的滤 出液回流。

已有的抗体浓缩方法存在着一些问题，包括例如，通量低，过程时间长， 膜面积大，机械回收产率和损失，密集的操作者介入或操作，传质速率低， 能量效率低，以及浓缩设备的水压限制等。上述问题及其它问题可促使制造 总成本增高，并最终增加治疗药消费者的花费。

需要改良的方法来制备高度浓缩的蛋白质制剂，例如液体抗体制品以及 其治疗产品。

发明概述

在一般意义上，本发明一般地涉及浓缩蛋白质的方法，例如浓缩抗体制 品的方法，含有该制品的药物制剂，及它们在人类治疗或动物治疗中的用途。

本发明在实施方案中提供制备高度浓缩的蛋白质，例如抗体制品的方法； 以及通过该方法制备的治疗产品，例如治疗性抗体产品。由此，本发明提供 一种浓缩蛋白质的方法，包括：对第一抗体制品进行第一超滤，以提供第二 抗体制品；对第二抗体制品进行渗滤，以提供经渗滤的中间抗体制品；对经 渗滤的中间抗体制品进行第二超滤，以提供第三抗体制品，其中所述第一超 滤，第二超滤和渗滤中的一项或多项是在升高的温度，例如约30℃到约50℃ 进行的。

本发明在实施方案中还提供一种浓缩蛋白质的方法，包括：对第一蛋白 质混合物进行第一超滤，以提供第二蛋白质混合物；对第二蛋白质混合物进 行渗滤，以提供经渗滤的蛋白质混合物；及对经渗滤的蛋白质混合物进行第 二超滤，以提供第三蛋白质混合物，其中所述第一超滤，第二超滤和渗滤中 的一项或多项是在例如约45℃进行。

本发明还在实施方案中提供通过上述方法制备的高度浓缩的抗体组合 物。

附图说明

图1显示本发明的实施方案中用于实现制备方法的装置。

图2到图17显示本发明的实施方案中过程的不同阶段或模式中观察或 测量到的不同过程值。

图18和19显示本发明的实施方案中升高的温度对产品质量的影响。

图20和21显示本发明的实施方案中升高的温度对生物负荷控制的影响。

图22显示本发明的实施方案中升高的温度对过程流量和过程时间的影 响。

图23到25显示本发明的实施方案中经放大的过程的不同阶段或模式中 观察或测量到的不同过程值。

发明详述

下面将援引附图(如果有的话)对本发明的不同实施方案进行详细的描述。 援引不同的实施方案并不限制本发明的范围；本发明的范围仅受本文所附的 权利要求书的限制。另外，本说明书中列出的任何示例都非意在限制，而仅 仅是提出被要求保护的发明的多种可能的实施方案中的一些。

除非另有说明，使用下述表述：

“超滤”(”ultrafiltering”，”ultrafiltration”，”ultrafiltered”，”UF”及类似术语) 涉及，例如，使用具有合适的物理和化学性质的合成半透膜(semi-permeable  membrane)，主要基于分子大小和形状来区分混合物中的分子，实现不同分 子的分离或相似分子的浓缩。

“渗滤”(”diafiltering”，”diafiltration”，”diafiltered”，”diafiltrating”，”DF” 及类似术语)涉及，例如，使用超滤膜从含有蛋白质、肽、核酸或其它生物 分子的溶液或混合物中去除或置换盐或溶剂，或降低盐或溶剂的浓度。

“跨膜压力”(transmembrane pressure)或“TMP”是指从膜的进液侧向 滤液侧所施加的平均压力，以TMP[bar]＝[(P_F+P_R)/2]-P_f计算，其中P_F是进液 压力，P_R是截留液(retentate)压力，P_f是滤液压力。