[发明专利]抗体文库筛选的方法

权利要求书

1.一种筛选分子文库以鉴别或选择所述分子文库中的作为一种或多 种靶体的候选结合伴侣的一种或多种成员的方法，所述方法包括：

(a)使表达文库与一种或多种靶体接触；

(b)使所述靶体接受至少一次清洗步骤；

(c)通过贯穿有机相的分离，使与所述表达文库的一种或多种成员 结合的靶体与所述表达文库未结合的成员分离，因而从其他文库成员中 分离所述靶体的候选结合伴侣。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述表达文库是噬菌 体展示文库。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述表达文库是抗体 表达文库。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述抗体表达文库包 括scFv抗体。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述靶体是细胞表面 分子或者附着于固相的分子。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述细胞表面分子以 完整细胞的组分或以细胞的膜片段的形式提供。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述靶体为抗原。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述细胞被编码所述 靶体的核酸转化或转染，或者被编码靶体文库的核酸转化或转染，或者 是过量表达所述靶体的细胞。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述细胞为真核细胞。

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述细胞与疾病状态 相关。

11.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述细胞为癌细胞。

12.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述固相为微粒固相。

13.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(a)中提供 了多于一种的靶体。

14.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(b)中进行 至少2次的清洗步骤。

15.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(b)中进行 1、2、3或4次清洗步骤。

16.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，通过离心进行所述贯 穿有机相的分离。

17.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在所 述方法步骤(a)之前进行的一次或多次预淘洗步骤，其中所述表达文库 与一种或多种非相关的实体进行接触。

18.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)至(c)被 重复一次或多次。

19.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)至(c)被 重复1、2或3次。

20.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，与所述表达文库的一 种或多种成员结合的所述靶体被进行进一步的分析。

21.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述靶体的候选结合 伴侣被进行进一步分析。

22.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述候选结合伴侣从 所述靶体中被移出、洗脱，或分离，或者独立于所述靶体被表达或产生。

23.根据权利要求21所述的方法，其特征在于，对所述候选结合伴 侣的所述进一步分析包括如下步骤：

i)使一种或多种所述候选结合伴侣在溶液中与一种或多种靶体接触；

ii)将与一种或多种所述候选结合伴侣结合的靶体捕获至固相；以及

iii)检测靶体的存在，因而检测靶体的一种或多种候选结合伴侣的存 在。

24.根据权利要求23所述的方法，其特征在于，所述靶体是细胞表 面分子或者附着于固相的分子。