[发明专利]检测大环内酯的方法与系统

权利要求书

1.检测在约180nm到约220nm的紫外-可见范围具有最大吸光度的大环内酯的方法，包括：

a)将含有所述大环内酯的样品施加至外部配有检测波长为约180nm到约220nm的紫外(UV)检测器的反相高效液相(RP-HPLC)柱；

b)用含有离子对试剂的流动相洗脱所述样品；和

c)用所述紫外检测器监测柱的流出液以检测位于所述检测波长的吸收峰或透射峰，所述峰对应于所述大环内酯。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述大环内酯在约180nm到约200nm的紫外-可见范围具有最大吸光度。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述大环内酯是9-(S)-红霉胺。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测波长是约190nm到约210nm。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测波长是约197nm到约205nm。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述离子对试剂含有(C₄-C₁₂烷基)磺酸盐。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述离子对试剂含有1-辛磺酸钠。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相还含有缓冲液。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述缓冲液是磷酸盐或硫酸盐缓冲液。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相的pH约为1到4。

11.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相在所述大环内酯的洗脱时程中在所述紫外检测器的检测波长上保持基本恒定的吸光度。

12.如权利要求11所述的方法，其特征在于，所述流动相在高于205nm的吸光度可忽略不计。

13.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括通过将所述峰的面积与标准品的面积进行比较来定量所述大环内酯。

14.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括利用所述紫外检测器检测位于所述检测波长的一种或多种其它吸收峰或透射峰来监测柱的流出液，从而检测所述样品中存在的杂质，所述一种或多种其它峰的峰面积大于所述大环内酯峰面积的0.05％并对应于一种或多种杂质。

15.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括通过以下步骤来测定所述样品的纯度：

i)利用所述紫外检测器检测位于所述检测波长的一种或多种其它吸收峰或透射峰来监测柱的流出液，所述一种或多种其它峰对应于一种或多种杂质；和

ii)测定所述检测器所检测到的峰的特性来计算所述样品中的杂质含量。

16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述特性是峰面积或峰高。

17.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述测定通过以下步骤进行：i)测定所检测的每种杂质和所述大环内酯的峰面积；和ii)计算所述大环内酯的峰面积相对于总的峰面积的百分比。

18.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述一种或多种其它吸收峰或透射峰的峰面积大于所述大环内酯峰面积的0.05％。

19.一种检测9-(S)-红霉胺的方法，包括：

a)将含有所述9-(S)-红霉胺的样品施加至外部配有检测波长为约200nm的紫外(UV)检测器的C18反相高效液相色谱(RP-HPLC)柱；

b)用含有水、乙腈、1-辛磺酸钠和硫酸盐缓冲液的流动相洗脱所述样品；和

c)用所述紫外检测器监测柱的流出液以检测位于检测波长的吸收峰或透射峰，所述峰对应于所述9-(S)-红霉胺。

20.一种检测大环内酯的系统，包括：

a)包括以下部分的反相高效液相色谱柱(RP-HPLC)：

i)包含反相固体载体的固定相；

ii)含有以下物质的流动相：

1)离子对试剂；

2)缓冲液；

3)水；和

4)乙腈，其中所述流动相在200nm的吸光度小于0.5；和

b)紫外(UV)检测器。