[发明专利]一株广谱苏云金芽孢杆菌及其制备杀虫剂的方法

权利要求书

1、一株广谱苏云金芽孢杆菌，其特征在于，该菌株名称为：苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)Hcy08-02，CCTCC NO.M202025。

2、根据权利要求1所述的苏云金芽孢杆菌，其特征在于，该菌株有以下特征：

(1)H血清型为H7；

(2)生化特征为：

形态特征和生化特性    Hcy08-02菌株杆状：宽(μm)      长(μm)革兰氏反应原生质上未染上色的小球芽孢  椭圆      圆形      内生或偏内生      芽孢囊膨大伴孢晶体运动性接触酶厌氧生长V-P反应V-P肉汤中的pH值生长温度(℃)：最高              最低卵黄反应在0.001％溶菌酶上生长在7％NaCL上生长在pH6.0培养基上生长    1.2-1.8    3.0-5.0    +    +    +    -    +    -    菱形    +    +    兼性嫌气菌    +    4.3-5.6    40-45    10-15    +    +    +    +葡萄糖产酸阿拉伯糖产酸木糖产酸甘露糖产酸水解淀粉利用柠酸盐还原NO3-NO21周内脱苯丙氨酸溶血试验RNA酶试验    +    -    -    -    +    +    +    -    +    +

(3)产生68～70千道尔顿和130～135千道尔顿两种杀虫晶体蛋白质；

(4)至少含有12个质粒，其中有一个分子量大于染色体DNA的质粒；

(5)杀虫晶体蛋白质基因为crylAc、crylAb、crylC、crylAa；

(6)对鳞翅目的棉铃虫、甜菜夜蛾、小菜蛾、菜青虫均有较高杀虫活性。

3、用权利要求1所述的苏云金芽孢杆菌Hcy08-02制备杀虫剂的方法，其特征在于，该方法按下列步骤顺序进行：

a、在发酵罐中放入发酵培养基；

b、用NaOH将培养基的pH值调至7.5-8.0；

c、蒸汽115-120℃灭菌25-30分钟；

d、将发酵培养基重量的0.001-0.005％的菌种放入60℃的温水中30分钟，制成孢子悬液；

e、待培养基的温度降至37℃时，把孢子悬液接入发酵罐中；

f、在32℃、400转/分、每分钟通气量与发酵罐容积比为0.8～1.2∶1的条件下发酵10小时；

g、在29℃、500转/分、每分钟通气量与发酵罐容积比为1.0～1.5∶1的条件下发酵10-14小时；

h、在32℃、500转/分、每分钟通气量与发酵罐容积比为1.0～1.5∶1的条件下发酵10-15小时；

i、在芽孢脱落50％时终止发酵，用HCL将发酵液的pH值调至4.5-5.0；

j、按照常规方法制备成各种规格的杀虫剂。

4、根据权利要求3所述的制备杀虫剂的方法，其特征在于，所述的发酵培养基各组份的重量百分比为：淀粉4.0、豆饼粉2.4、棉子饼粉1.5、蛋白胨0.5、酵母粉0.4、玉米浆2.0、MgSO₄7H₂O 0.04、KH₂PO₄ 0.2、K₂HPO₄ 0.2、CaCO₄ 0.1、α-淀粉酶0.01、余者为水。