[发明专利]魔芋凝集素蛋白编码序列及其应用

权利要求书

1.一种分离出的DNA分子，其特征在于，它包括：编码具有魔芋a-Lectin蛋白质活性的多肽的核苷酸序列，而且所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.3中从核苷酸第17-493位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO.3中从核苷酸第17-493位的核苷酸序列杂交。

2.如权利要求1所述的DNA分子，其特征在于，所述的序列编码具有SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列的多肽。

3.如权利要求1所述的DNA分子，其特征在于，该序列具有SEQ ID NO.3中从核苷酸第17-493位的核苷酸序列。

4.一种分离出的魔芋a-Lectin蛋白多肽，其特征在于，它包括：具有SEQ IDNO.4氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。

5.如权利要求4所述的多肽，其特征在于，该多肽是具有SEQ ID NO.4序列的多肽。

6.一种载体，其特征在于，它包含权利要求1所述的DNA。

7.一种用权利要求6所述载体转化的宿主细胞，其特征在于它是原核或真核细胞。

8.一种产生具有魔芋a-Lectin蛋白质活性的多肽的方法，特征在于其步骤如下：

(1)将编码具有魔芋a-Lectin蛋白活性的多肽的纯化的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，形成魔芋a-Lectin蛋白表达载体，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.3中从核苷酸第17-493位的核苷酸序列有至少70％的同源性；

(2)将步骤(1)中的表达载体转入宿主细胞，形成魔芋a-Lectin蛋白的重组细胞；

(3)在适合表达魔芋a-Lectin蛋白多肽的条件下，培养步骤(2)中的重组细胞；

(4)分离出具有魔芋a-Lectin蛋白活性的基本纯的多肽。

9.一种利用转基因技术将编码具有魔芋a-Lectin蛋白活性多肽的核苷酸序列转化入植物以提高植物对病虫害抗性的方法，以及魔芋a-Lectin蛋白基因在改良植物病虫害抗性上的应用，特征在于其步骤如下：

(1)将编码具有魔芋a-Lectin蛋白活性的多肽的纯化的核苷酸序列可操作地连于植物表达调控序列，形成含魔芋a-Lectin蛋白的植物表达载体，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.3中从核苷酸第17-493位的核苷酸序列有至少70％的同源性；

(2)将步骤(1)中的表达载体转入植物细胞；

(3)通过筛选如抗生素筛选，获得转化细胞并最终再生转基因植株及其后代，包括植物种子及植物组织。转基因植物及其后代对植物病虫害具有增强的抗性。

10.一种能与权利要求7所述的魔芋a-Lectin蛋白多肽特异性结合的抗体，其特征在于它包括多克隆抗体和单克隆抗体。

11.一种核酸分子，其特征在于，它包含权利要求1所述的DNA分子中8-100个连续核苷酸。

12.一种用于检测样品中是否存在魔芋a-Lectin核苷酸序列的方法，其特征在于它包括用权利要求10所述探针与样品进行杂交，然后检测探针是否发生了结合，该样品是PCR扩增后的产物，其中PCR扩增引物对应于魔芋a-Lectin核苷酸编码序列，并可位于该编码序列的两侧或中间，引物长度为15～50个核苷酸。