[发明专利]呋喃丹半抗原、抗原和抗体及其制备方法

说明书

本发明涉及杂环化合物及其制备方法，尤其涉及一种呋喃丹半抗原、抗原和抗体及其制备方法。

农药及其代谢产物传统的残留分析方法主要是依靠气相色谱(GC)，液相色谱(HPLC)或质谱等物化分析手段，但由于农药使用规模不断扩大，农药残留造成环境影响和对人类健康的慢性和长期效应日益受到人们关注和担忧，对农药残留的限制也因此越来越严格，对分析测定对象、种类、数量、范围、指标等诸方面都提出了新的要求和更高的标准，但传统的理化分析方法通常繁琐复杂，样品前处理过程复杂、工作量大、仪器昂贵、要求有熟练的技术人员及较长的分析周期。因此人们迫切希望有一种简单、快速、灵敏及价廉的检测技术能在野外和实验室内进行大批量的筛选试验。免疫分析法正具备这些优点，所以尽管免疫分析应用于农药残留分析的时间很短，但已很快用于环境样品和食品中农药残留的分析。

1958年Berson S.A和Yallow创立了放射免疫分析法(RIA)，并首先在生物医学和临床药物定量测定得到广泛应用。由于农药残留分析对象的复杂性，直到八十年代免疫分析才被逐渐应用于这一领域，免疫分析技术可达到传统理化分析技术无法达到的选择性和灵敏度，并且，快速、简便，适于检测生物大分子，也可以检测复杂样本中小分子如农药等痕量组分。

第一个农药免疫分析的报道是1967年Centen等人制备的农药马拉硫磷的抗血清，通过抗原抗体沉淀反应，证明了抗血清与马拉硫磷的可反应性。从1967年到70年代末的10余年间，由于技术上的局限，尽管已开发出了几个农药的免疫分析方法，但仍未受到普遍重视，发展相当缓慢。进入80年代以来，由于人们对分析方法的选择性和灵敏度的要求越来越高，同时对分析对象的种类和环境样品的数量要求也在不断增加，具有高度特异性、灵敏性、快速性的免疫检测技术在农药分析领域得到了较快的发展。进入90年代以来，农药的免疫检测技术发展迅速，到目前为止，已有60多种农药开发了免疫检测技术，其中除草剂和杀虫剂较多，杀菌剂较少。国内这方面的研究也渐渐起步，已有关于对硫磷、三唑酮、禾大壮、甲胺磷、莠去津均三氮苯类等农药的半抗原合成的报道。

呋喃丹(Carbofuran，2，3，-二氢-2，2-二甲基-7-苯并呋喃基-N-甲基氨基甲酸酯)自1969年由FMC公司和Mobay化学公司开发生产后即作为一种高效、广谱的杀虫、杀线虫剂，在世界范围内广泛应用于粮食、蔬菜、水果及经济作物等害虫的防治。但是由于呋喃丹的毒性大，在酸性土壤中不易降解，极易污染土壤和地下水源。近年来，由于呋喃丹造成的环境生物毒害，屡见不鲜。尤其是在作物和蔬菜上的大量使用，形成农药残留，对人体健康造成极大的危害，这已引起人们的关注。因此开发一种简单、快速，适于农药残留现场监控的痕量分析方法具有重要的现实意义。

检测呋喃丹残留量常规方法有气相色谱法(GC)和高效液相色谱法(HPLC)。由于呋喃丹在通常气相色谱条件下易分解成酚类，用GC分析易产生较大误差，当然这个问题可通过改变操作条件或将农药衍生化来解决。目前指定的检测N-甲基氨基甲酸酯类农药的较灵敏的方法是用带荧光检测器的HPLC柱后衍生化法。然而这些方法的灵敏度受样品的净化，浓缩，衍生化等步骤的影响很大；再者这些方法需要大多数实验室所不具备的复杂的仪器，且过程繁琐，不适合大批量样品的检测与分析。免疫分析为呋喃丹残留研究提供了一个新的分析检测途径。

本发明的目的是提供一种特异性、灵敏度、准确度高，精确度好、操作方法简单快速的呋喃丹半抗原、抗原和抗体及其制备方法。

为了达到上述目的，本发明采取下列措施：

呋喃丹半抗原的分子结构为：

n为从1至20的任意自然数

呋喃丹抗原的分子结构为：

呋喃丹抗体是能与呋喃丹发生特异性免疫反应的免疫球蛋白。

一种呋喃丹半抗原的制备方法的步骤为：

1)呋喃酚1份溶解在1～4份甲苯中，通入光气1～2份，加氢氧化钠至溶液呈碱性，反应温度为-10～10℃，反应得到一混合物；

2)将上述混合物进行液-液分配，然后经减压浓缩得呋喃酚和产物的油状混合物，此油状混合物待冷却后析出一无色结晶，即为2，3-二氢-2，2-二甲基-7-苯并呋喃基氯甲酸酯；