[发明专利]鼻咽癌恶性转化基因Tx基因DNA序列及其测定方法

权利要求书

1 鼻咽癌恶性转化基因Tx基因gDNA序列全长13kb，与人免疫球蛋白kappa轻链基因高度同源，其特征在于：

1)Tx基因含有Igκ的J1-J5五个J区，一个C区，但缺乏

  Igκ的C区，除此之外，Tx还有重组信号序列

  (recombination signal sequence，RSS)、N-segment、核基

  质相关区(matrix associated region，MAR)等序列，与

  正常的Igκ基因的JC区gDNA比较，Tx基因在某些位

  点存在缺失或点突变，Tx基因是一缺乏V区的异常的

  人免疫球蛋白kappa轻链基因。

2)用分子克隆的方法可以直接克隆出Tx基因的cDNA序

  列。

2 按照权利要求1所述的Tx基因，其特征在于克隆人鼻咽癌恶性转化基因Tx基因的方法是：将人鼻咽癌细胞系CNE2作为克隆Tx基因的来源，提取该细胞系的gDNA，打断成9-22kb的片段，重组到载体λDash中，转染JB6细胞株，挑取在软琼脂上形成的阳性克隆，提取该阳性克隆的gDNA，将其再次打断，重组到λDash载体中，转染JB6细胞系，挑取在软琼脂上形成的阳性克隆，经过这样的三次筛选，最后得到一个长约13kb的Tx基因。

3 按照权利要求1、2所得到的Tx基因gDNA经过测序，确定Tx基因全序列是：       1 gtgtggaggg aaaggtgtga acccgggagg cggagcttgc agtgagccaa gatcgcacca  61 ctgcactcca gcctgggcga cagagcgaga ctccgtctca aaaaaaataa ataaataaaa 121 taaaaaataa ttaggtactc taggcccagt gacctgtctc tgtactctgt aaattcaggt 181 cacctgctca gggctaatct gagagaaggt ctctcttcag ttgaattttg aaagacaatt 241 agcagttcac aagctaaccc aggtggacaa agatgttccc aagcagaggg agtgcttgtg 301 aaagctggag gccatagaaa aactctaagg agtgtaggga ggtgggagta atgtatggaa 361 ggggtggaga tggaaggtta agagagatac aaggctgcaa aaatggagct ggactcaaaa 421 gaaaatactg aaaaggtctt cagtgttgtt gatgagatta ctatggaaac actatggaac 481 actgggactc catggcagct ccaaagatgg catgcgcctg gtccagctca gtaagagctg 541 agctcttcct gtgctgtgaa aacagacaaa ccaaccaagt aaagtctact tttctactct 601 attagtcttc actttggttt cgtataccat ctggagctac atttcaaaat gcatttcaaa 661 gttatgagcc ttaagttgat atatatttag tctacctttt tttaaataac attgcagcaa 721 aggagaagat aaaatagtaa gacaacctgt aattattact cattgagaag ctgatgattt 781 ccataattac actaaatgaa gtttatcctt tgcaaaagcc cccccagccc accccaaaag 841 aaagtacaaa aaaactggcc atttttttta attgcttgtt tttctttgta attaacattc 901 agtctacttt ctaaaaaata aataaataat aagcagtcca gatgtggcaa gttgctaaag 961 aaaggaacca tcaggccata gacgtaaata tattctcttc ttggatttta ggtctcacct1021 aagaaaataa acacatgcta tgtcagagaa gcctcagggt ttccacacct gctcgaaaag1081 ggagttgagc ttcagcagct gacccaggac tctgttcccc tttggtgaga agggtttttg1141 ttcagcaaga caatggagag ctctcactgt ggtggacgtt cggccaaggg accaaggtgg1201 aaatcaaacg tgagtagaat ttaaactttg cttcctcagt tgtctgtgtc ttctgttccc1261 tgtgtctatg aagtgatcta taaggtgact ctgcaatcag cctctgatat ccttcaggga1321 aaagataaag ataagtctgt agtcaaactc gagaattgat tgcacatttt ctttgaagag1381 caagcaagat tcagtcattg ggtgagaata acttgtctaa gtaatagctt cagaaatgtc1441 ctggggaaca taacatgttc tggacagagc cttggtcaat tgtcagaaag ggagtttttg1501 tataggaggg aagttaagag gaaccatgtg tgtacacttt tggccagggg accaagctgg1561 agatcaaacg taagtacttt tttccactga ttcttcactg ttgctaatta gtttactttg1621 tgttcctttg tgtggatttt cattagtcgg atgccaggga tctaacaaac ttcattccca1681 ggttaggtac agaggagggg aaattgttcc acaggacgct agcttgtggc taatttttaa1741 gatttctaaa tcaaaataac ttcattgggg gaaagaggct tgctgagctt tcagggaggt1801 ttttgtaaag ggaaaagtta agacgaatca ctgtgattca ctttcggccc tgggaccaaa1861 gtggatatca aacgtaagta catctgtctc aattattcgt gagattttag tgccattgta1921 tcatttgtgc aagttttgtg atattttggt tgaataaacc tggtgaccca gaagtaaata1981 gcaggacacc agaaaatgaa cttaaaaagc tgagcaaata gacgaatcat tgggtttgag2041 aggagaatag gattcatggg ggaaatgggg aagaaatagc tagatttttc tctgaacaag2101 cagcctatct catatgattg gcttcaagag aggtttttgt tgaggggaaa gggtgagatc2161 cctcactgtg gctcactttc ggcggaggga ccaaggtgga gatcaaacgt aagtgcactt2221 tcctaatgct ttttcttata aggttttaaa tttggagcgt ttttgtgttt gagatattag2281 ctcaggtcaa ttccaaagag taccagattc tttcaaaaag tcagatgagt aagggataga2341 aaattagttc atcttaagga acagccaagc gctagccagt taagtgaggc atctcaattg2401 caagattttc tctgcatcgg tcaggttagt gatattaaca gcgaaaagag atttttgtta2461 aggggaaagt aattaagtta acactgtgga tcaccttcgg ccaagggaca cgactggaga2521 ttaaacgtaa gtaatttttc actattgtct tctgaaattt gggtctgatg gccagtattg2581 acttttagag gcttaaatag gagtttggta aagattggta aatgagggca tttaagattt2641 gccatgggtt gcaaaagtta aactcagctt caaaaatgga tttggagaaa aaaagattaa2701 attgctctaa actgaatgac acaaagtaaa aaaaaaaagt gtaactaaaa aggaaccctt2761 gtatttctaa ggagcaaaag taaatttatt tttgttcact cttgccaaat attgtattgg2821 ttgttgctga ttatgcatga tacagaaaag tggaaaaata cattttttag tctttctccc2881 ttttgtttga taaattattt tgtcagacaa caataaaaat caatagcacg ccctaagaaa2941 aatcagggaa aagtgaagtg tacctatttg ctatgtagaa gaggcagctt acttgaaaat3001 cagcagcaat gttgttttta gagtctgtaa taagtaataa actcaaaaag acacattcta3061 taggaataag ggcttcacag atagagctca ttttttaaaa atccaatttg tacattagac3121 taaacgtgaa attatctctt attgtaatgg tggaaaggtg gttattccca aaagctcaat3181 ttcaaagaaa tgtgtttaaa tgaaaaaaag taaataattg cattttttaa tgaccgtggg3241 tctgtgaaaa aaataggaaa tattttaaag agtatgttct ttcattatcc tctgttatta3301 cttgtctaca tttttattct gccaagaagg ccgtggcacc gcgagctgta gacagagccg3361 cggtctttct cgattgagtg gctttggtgg ccatgccacc gcgctcttgg ggcagccgcc3421 ttgccgctag tggccgtggc caccctgtgt ctgcccgatt gatgctgccg tagccagctt3481 tcctgatgca cagtgataca aataatgcca ctaagggaaa gagaacagaa acgtaatggg3541 cgctgagctg ggaaaaccag ggagaagact gatttattag agatttcaga aataaaattc3601 acattcatta tgatatctca ttagtgaaaa tttccattag gggattgtaa ataatttaaa3661 gctttttttt ttcagtgcta tttaattatt tcaatatcct ctcatcaaat gtatttaaat3721 aacaaaagct caaccaaaaa gaaagaaata tgtaattctt ttcagagtaa aaatcacacc3781 catgacctgg ccactgaggg cttgatcaat tcactttgaa tttggcatta aataccatta3841 aggtatatta actgatttta aaataagata tattcgtgac catgttttta actttcaaaa3901 atgtagctgc cagtgtgtga ttttatttca gttgtacaaa atatctaaac ctatagcaat3961 gtgattaata aaaacttaaa catattttcc agtaccttaa ttctgtgata ggaaaatttt4021 aatctgagta ttttaatttc ataatctcta aaatagttta atgatttgtc attgtgttgc4081 tgtcgtttac cccagctgat ctcaaaagtg atatttaagg agattatttt ggtctgcaac4141 aacttgatag gactatttta gggccttttt aaagctctat taaaactaac ttacaacgat4201 tcaaaactgt tttaaactat ttcaaaatga ttttagagcc ttttgaaa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