[发明专利]林蛙卵油的超临界提取工艺

说明书

本发明涉及医药技术领域，确切地说它是一种林蛙卵的超临界提取工艺。

林蛙也称哈士蟆(Rana Temporaria Chensinensis David)为脊索动物门，两牺纲，无尾目，蛙亚科，林蛙属，中国林蛙种。林蛙是我国传统名贵补品和滋补性中药材，史料最早见于《饮片新参》，记载林蛙及其输卵管(蛤蟆油)补而不燥，润肺生津，入肾，清肺润喉。历代医书均作为补品将其著录，其产品为哈士蟆油(林蛙输卵管)及哈士蟆即林蛙的干燥全体。

近年，我国学者李成义先生对林蛙卵进行溶剂提取并分析证明林蛙卵中含有丰富的氨基酸，三十多种微量无素，多种不饱和脂肪酸，维生素D、E，雌激素和孕激素等多种生物活性物质(中药及天然药物1994；29：712)。中国专利CN1066590A公开了活取哈士蟆油及卵的方法；CN1117352A公开了中华雪哈精(活取的哈士蟆油及卵)及其组合物制成保健食品的方法。中国专利CN1212140公开了促钙吸收作用的林蛙卵组合物，这些方法揭示：林蛙卵含有丰富的营养物质，对机体具有多方面的调节作用。但用有机溶剂对林蛙进行提取会引入杂质，用易燃易爆危险，不便于工业化大生产。

本发明的目的是提供一种林蛙卵油的超临界提取工艺，该工艺可提出林蛙卵中的脂溶性成分，它采用二氧化碳超临界萃取装置提取，具有工艺可靠，并且适合工业化生产的特点，没有易燃易爆的危险，安全性较高。

本发明的目的是通过如下方案实现的，它采用超临界萃取工艺提取，其特征在于：取去掉林蛙油后的林蛙，令其充分阴干，将干燥的卵剥出，

拣净杂质，将卵粉粉碎成粗粉，加入夹带剂，用CO₂超临界萃取装置在压力为5Mpa～50Mpa、温度17～75℃条件下萃取30-360分钟，接着在分离罐中分离并分离卵油，将卵油静置后过滤，减压回收乙醇，即得成品。夹带剂为乙醇，含量为0-50％。

本发明的优点是：工艺比较简单，没有易燃易爆的危险，适合工业化大生产，并且提取率较高，提取物中没有残留溶剂，重金属含量极低。

下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细的描述。

图1为本发明的液相色谱质分析结果图。

图2为本发明的气相色谱质谱联用分析结果图。

本发明采用的是二氧化碳超临界萃取装置在压力为15Mpa～32Mpa、温度为40～45℃条件下萃取，经实验证明工艺安全可靠，适于工业化大生产。实验受试物由辽宁省清原县南山城镇大北岔沟林蛙管理场提供的林蛙干燥卵，呈黑色颗粒状，鱼腥味固体。实验仪器为南通华安超临界萃取有限公司提供的HA121-50-05超临界萃取装置。取去掉林蛙油后的林蛙，令其充分阴干，将干燥的卵小心剥出，拣净杂质，将卵粉粉碎成粗粉，用CO₂超临界装置进行萃取。在CO₂超临界萃取工艺中，温度、压力、时间及夹带剂用量是至关重要的因素，因此着重对这几个方面进行考察，温度采用33、38和43℃，压力选15、25和35Mpa三种压力，时间采用30、60和90分钟，夹带剂选用乙醇，分别用0.5％、2.5％、5.0％三个水平(表1)。以提取物的量为评价指标，采用正交实验设计L₉(3⁴)表(表2)的安排进行实验，提取过程中，CO₂流量控制在30-50kg/h，分离罐1的压力为8-11Mpa，

表1因素水平表因素    温度(A)  压力(B)  时间(C)    乙醇(D)水平1    33℃    15Mpa     30min     0.5％水平2    38℃    25Mpa     60min     2.5％水平3    43℃    35Mpa     90min     5.0％表2中国林蛙卵CO₂超临界萃取结果组别    组合    产量(g)1    A1B1C1D1    252    A1B2C2D2    873    A1B3C3D3    2354    A2B1C2D3    905    A2B2C3D1    1456    A2B3C3D1    1337    A3B1C3D2    1158    A3B2C1D3    1219    A3B3C2D1    98

分离罐2的压力为4-5Mpa，萃取完成后在分离罐中分离卵油，将卵油静置后过滤，减压回收乙醇，即得成品。