[发明专利]一种新的多肽——人周期蛋白依赖激酶16.82和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人周期蛋白依赖激酶16.82，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

细胞周期的调控保证了细胞产生具有正常遗传功能和生理功能的子代细胞。如果这些调控途径异常，周期不能正常运转和丧失周期关键事件的忠实性，从而导致遗传性能紊乱、增殖分化异常和细胞癌变，甚至导致死亡。

周期蛋白家族(cyclin)和周期蛋白依赖激酶家族(cyclin-dependent kinase，Cdk)是两个重要的、相关的周期调控酶家族。Cdks与cyclins结合形成异源二聚体的复合物，具有蛋白激酶活性。由催化亚基和调节耀基组成。Cyclin为调节亚基，Cdk为催化亚基。只有与相应的cyclin结合后，在一些蛋白激酶如weeI/mikI，CAK(Cdk-activating kinase)和磷酸酶p80^cdc25参与下经过磷酸化和去磷酸化作用Cdk才能表现出激酶活性。Cdk-cyclin复合物可参与磷酸化多种蛋白调节与DNA复制和有丝分裂等有关的众多分子事件。

在高等真核生物中，cyclin家族成员根据起序列的相似机生理功能备份为不同类型。如cyclin A、B、C、D、E、F、G、H等；Cdk家族成员有Cdk1、Cdk2、Cdk3、Cdk4、Cdk5、Cdk6、Cdk7等。每种Cdk结合不同类型的cyclin。Cdk家族和cyclin家族成员间的协调配合，调节细胞从G1-S、G2-M和退出有丝分裂的各个进程。例如，Cdk4等与D型cyclins等的复合物主要在G1期R点起作用。Cdk2在G1期和早S起分别与cyclin D和cyclin E结合，作用于G1/S和S期的起始。

CDK8是一种在人中发现的新的CDK蛋白。试验证明CDK8可以与cyclinC结合形成一种类似于SRB10-SRB11的蛋白复合物。而SRB10-SRB11这种CDK-cyclin复合物是酵母中的RNA聚合酶II的全酶的一部分。因此可以认为人CDK8可能在转录中起一定作用，并在生长因子-调控信号的传递中起一定作用。【p Proc NatlAcad Sci U S A 1995 Sep 12；92(19)：8871-5】

通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本发明的多肽的表达谱与人周期蛋白依赖激酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本发明被命名为人周期蛋白依赖激酶16.82。

由于如上所述人周期蛋白依赖激酶16.82蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人周期蛋白依赖激酶16.82蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人周期蛋白依赖激酶16.82蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人周期蛋白依赖激酶16.82以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人周期蛋白依赖激酶16.82的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人周期蛋白依赖激酶16.82的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人周期蛋白依赖激酶16.82的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人周期蛋白依赖激酶16.82的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人周期蛋白依赖激酶16.82的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人周期蛋白依赖激酶16.82异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。