[发明专利]介导除虫菌素B2:B1比例的除虫链霉菌基因

权利要求书

1.一种多核苷酸分子，其含有与除虫链霉菌aveC等位基因的简并变体或质粒pSE186(ATCC 209604)上AveC基因产物编码序列或图1(SEQ ID NO：1)所示除虫链霉菌aveC ORF的核苷酸序列相同的核苷酸序列，但该核苷酸序列还包含一或多个突变，所述突变使得除虫链霉菌ATCC 53692株中野生型aveC等位基因已失活但能表达含所述突变型核苷酸序列的多核苷酸分子的那些细胞产生除虫菌素，且所产生的除虫菌素中2类∶1类的比例相对于除虫链霉菌ATCC 53692株中仅表达野生型aveC等位基因的那些细胞所产生的比例降低。

2.权利要求1的多核苷酸分子，其中所述除虫菌素2类∶1类为除虫菌素环己基B2∶环己基B1。

3.权利要求1的多核苷酸分子，其中所述核苷酸序列中的一或多个突变编码AveC基因产物中一或多个氨基酸残基的取代，所述氨基酸残基选自对应于SEQ ID NO：2的氨基酸位置上的第138和139位氨基酸残基。

4.一种重组载体，其含有权利要求1的多核苷酸分子。

5.一种链霉菌属宿主细胞，其含有权利要求1的多核苷酸分子或权利要求4的重组载体。

6.一种多核苷酸分子，其含有与除虫链霉菌aveC等位基因或质粒pSE186(ATCC 209604)上AveC基因产物编码序列，或图1(SEQ ID NO：1)所示除虫链霉菌aveC ORF的核苷酸序列相同的核苷酸序列，或其简并变体，但该核苷酸序列还包含至少第一和第二突变，所述突变使得除虫链霉菌ATCC 53692株中野生型aveC等位基因已失活但表达含所述突变型核苷酸序列的多核苷酸分子的那些细胞产生除虫菌素，且所产生的除虫菌素中2类∶1类的比例相对于由除虫链霉菌ATCC 53692株中仅表达野生型aveC等位基因的那些细胞所产生的比例降低，其中所述第一突变编码AveC基因产物中对应于SEQ ID NO：2上第138位氨基酸的氨基酸残基从丝氨酸到苏氨酸的取代，所述第二突变编码AveC基因产物中对应于SEQ ID NO：2上第139位氨基酸的氨基酸残基从丙氨酸到苯丙氨酸的取代。

7.权利要求6的多核苷酸分子，其中所述除虫菌素2类∶1类为除虫菌素环己基B2∶环己基B1。

8.权利要求7的多核苷酸分子，其中所述降低的环己基B2∶环己基B1的比例为约0.75∶1或更低。

9.一种重组载体，其能通过导入至少一种突变而使除虫链霉菌的aveC等位基因发生突变，所述突变选自第一突变和第二突变，所述第一突变编码AveC基因产物中对应于SEQ ID NO：2上第138位氨基酸的氨基酸残基从丝氨酸到苏氨酸的取代，所述第二突变编码AveC基因产物中对应于SEQ IDNO：2上第139位氨基酸的氨基酸残基从丙氨酸到苯丙氨酸的取代，所述重组载体包含携带了编码所述突变之核苷酸序列的多核苷酸分子。

10.权利要求9的重组载体，其含有权利要求6的多核苷酸分子。

11.一种链霉菌属宿主细胞，其含有权利要求6的多核苷酸分子或权利要求10的重组载体。